Liquide péritonéal. Raisons de l'apparition de liquide libre dans l'espace de Douglas (rétrouterine)

L'espace Douglas ou rétro-utérin est un espace anatomique situé dans la partie postérieure de l'utérus. bassin femmes. Il est situé entre la paroi postérieure de l'utérus, le col de l'utérus, le cul-de-sac vaginal postérieur et la paroi antérieure du rectum. En termes physiologiques, la poche de Douglas est dite libre, c'est-à-dire qu'elle ne contient ni liquide ni tissu.

La présence de traces de liquide dans l'espace rétro-utérin peut indiquer une ovulation et, dans ce cas, il n'y a pas lieu de s'inquiéter. Un plus grand volume de liquide peut être visualisé lors d’une échographie transvaginale. Il est toujours nécessaire de déterminer la nature de la sécrétion détectée - liquide sanglant, liquide péritonéal (ascite), pus, etc. A cet effet, une ponction diagnostique de l'espace rétro-utérin est souvent réalisée pour obtenir du matériel de recherche et déterminer la cause probable. d’accumulation de liquide.

Les raisons de la présence de liquide dans la poche de Douglas sont généralement des maladies des organes génitaux, mais pas toujours. Si du liquide apparaît dans l'espace rétro-utérin certains jours cycle menstruel, il n'y a aucune raison de s'inquiéter.

Les femmes et les filles sexuellement matures - surtout immédiatement après l'ovulation (juste après la moitié du cycle) - ont régulièrement une petite quantité de liquide libre. Toutefois, si la présence de liquide est détectée dans la première phase du cycle ou à la fin de la seconde, et en grandes quantités, vous pouvez alors suspecter une pathologie des appendices utérins ou cavité abdominale.

Le liquide dans l'espace rétro-utérin provoque

Le plus raisons courantes l'apparition de liquide derrière l'utérus sont des maladies :

rupture d'un kyste ovarien;
hydropisie de l'ovaire;
l'endométriose;
rupture d'une grossesse extra-utérine;
annexite;
cancer des ovaires;
péritonite;
entérite;
cirrhose du foie;
hyperstimulation ovarienne (après stimulation hormonale).

Selon la nature du liquide derrière l'utérus :

La présence de liquide sanglant derrière l’utérus peut résulter de :

saignement dans la cavité abdominale à partir des organes pelviens,
rupture de grossesse extra-utérine,
rupture de kystes ovariens,
présence de foyers d'endométriose péritonéale.

Une grande quantité de liquide ascitique (péritonéal) peut être due à :

cancer génital féminin (ovaire, trompe de Fallope, col de l'utérus),
cirrhose du foie,
insuffisance circulatoire.

La présence de liquide purulent peut indiquer :

inflammation du bassin (par exemple, des appendices);
ou de la cavité abdominale (par exemple, péritonite, maladie inflammatoire de l'intestin).

Maladies dans lesquelles il y a du liquide libre dans l'espace de Douglas

Rupture du kyste ovarien

Un kyste ovarien est un espace anormal à l’intérieur de l’ovaire, entouré d’une paroi. Il existe plusieurs types de kystes ovariens : simples, remplis de liquide séreux, les kystes dermoïdes et les kystes de l'endomètre (kystes chocolatés qui se forment au cours du processus d'endométriose). Parfois, un kyste peut se former sur le site d'un follicule non rompu pendant l'ovulation - ce type de kyste a tendance à être spontanément absorbé. Malheureusement, il peut aussi arriver qu'un kyste dans l'ovaire indique la présence d'un cancer. Les kystes peuvent parfois ne provoquer aucun symptôme et sont découverts accidentellement lors d’une échographie abdominale de routine. Parfois cependant, leur présence peut provoquer divers maux :

Irrégularités menstruelles,
saignements irréguliers non liés à cycle mensuel,
douleur abdominale,
douleur dans la région ovarienne où se trouve le kyste.

Il arrive que le kyste se rompe, alors la femme se sent douleur sévère, et lors d'une échographie abdominale, ils constatent la présence de liquide dans l'espace rétro-utérin. Le traitement des kystes, s'ils ne donnent aucun symptôme, ne peut consister qu'en leur observation systématique. Cependant, si les kystes posent problème ou grossissent, ils doivent être retirés (soit par laparoscopie, soit par laparoscopie). méthode traditionnelle selon le type de kyste).

Rupture d'une grossesse extra-utérine (ectopique)

Quand survient une grossesse extra-utérine ? Une grossesse extra-utérine se produit lorsque des ovules fécondés s'implantent dans un endroit autre que le corps utérin. L'incidence des grossesses extra-utérines est estimée à environ 1 % de toutes les grossesses. Le site le plus courant de grossesse extra-utérine est la trompe de Fallope. En fait, l’embryon peut s’implanter presque n’importe où : dans le col de l’utérus, l’ovaire ou la cavité abdominale. La grossesse abdominale ou cervicale est la plus dangereuse pour la santé et la vie d’une femme, mais heureusement, elle se produit très rarement.

Quels sont les symptômes d'une grossesse extra-utérine ? Lors d'une grossesse extra-utérine, il peut y avoir écoulement anormal et des saignements, en plus, il y a des douleurs abdominales et parfois des difficultés à aller à la selle. Dans une situation où une grossesse extra-utérine se rompt, des douleurs abdominales aiguës apparaissent tandis qu'une échographie révélera du liquide dans la poche de Douglas. Le traitement de la grossesse extra-utérine est toujours chirurgical.

Inflammation des appendices

L'annexite est caractérisée par ce qu'on appelle la voie ascendante - les microbes vaginaux pénètrent dans les organes supérieurs du système reproducteur féminin. Jusqu'à récemment, l'agent pathogène le plus courant provoquant une inflammation des appendices était le gonocoque. Actuellement, en raison d’une diminution significative de l’incidence de la gonorrhée, la bactérie n’est plus l’organisme le plus répandu. Les facteurs étiologiques de l'annexite comprennent également les agents pathogènes suivants :

la chlamydia;
mycoplasma genitalis et autres mycoplasmes ;
coli;
streptocoques du groupe B et autres streptocoques ;
Gardnerella gardnerella vaginalis.

Les chlamydia et les gonocoques participent le plus à la formation d'infections conduisant à une inflammation des appendices.

Quels symptômes provoque l’annexite ? Tout d’abord, il peut y avoir des douleurs dans le bas-ventre, généralement bilatérales. De plus, une dyspareunie (douleur lors des rapports sexuels) peut être présente, ainsi qu'un écoulement anormal du tractus génital associé à une inflammation du col de l'utérus ou du vagin. Des saignements anormaux se produisent - saignements intermenstruels ou saignements menstruels très abondants et fièvre supérieure à 38 ° C. Une échographie peut révéler la présence de liquide derrière l'utérus. Le traitement de l'inflammation des appendices consiste en l'utilisation d'antibiotiques et d'un traitement symptomatique.

Cancer des ovaires

Ce cancer ne provoque aucun symptôme pendant longtemps, la présence de symptômes tels que des douleurs dans le bas-ventre, une hypertrophie abdominale ou des saignements vaginaux indiquent malheureusement la gravité du cancer.

Péritonite

La présence de liquide purulent dans l'espace rétro-utérin peut indiquer la présence d'une péritonite et nécessite une clarification du diagnostic et de l'examen. tube digestif et des voies urinaires.

Symptômes de liquide dans l'espace de Douglas

Les symptômes dépendent de la cause de l’accumulation de liquide. Par exemple, en cas de rupture d'un kyste de l'ovaire, des douleurs dans la cavité abdominale peuvent apparaître, qui deviennent périodiquement aiguës et coupantes, des nausées et des vomissements, de la diarrhée et une perte d'appétit. Si une grossesse extra-utérine se rompt, vous pouvez ressentir des saignements vaginaux, des douleurs dans le bas de l'abdomen, des douleurs dans les ovaires et parfois une sensation de selles incomplètes.

Lorsque les appendices deviennent enflammés, des crampes soudaines apparaissent des deux côtés de l’abdomen, s’intensifiant pendant les rapports sexuels. Parfois, elle irradie vers l’aine et les cuisses. Accompagné de faiblesse, de fièvre ou d'état fébrile.

Ponction diagnostique à travers le cul-de-sac vaginal postérieur

La ponction de l'espace rétro-utérin est une méthode invasive simple, particulièrement utile pour diagnostiquer les saignements dans la cavité abdominale des organes pelviens et pour détecter une grossesse extra-utérine interrompue. L'intervention est réalisée sous anesthésie générale en milieu hospitalier. La ponction de la poche de Douglas est réalisée à travers le vagin à l'aide d'une seringue de 20 ml et d'une aiguille d'une longueur de min. 20 cm et diamètre 1,5 mm. Après avoir inséré le spéculum, le gynécologue insère une aiguille dans le cul-de-sac vaginal postérieur puis aspire son contenu dans une seringue.

Parfois la ponction est réalisée sous guidage échographique pour éviter les risques de perforation des gros vaisseaux pelviens. Une fois l’aiguille retirée, le contenu de la seringue est soigneusement inspecté. Le matériel obtenu peut également être soumis à un examen cytologique ou bactériologique. La détection de fragments de caillot ou de liquide sanglant peut indiquer un saignement dans la cavité abdominale dû à une grossesse extra-utérine perturbée. Cette condition, accompagnée de symptômes cliniques, biologiques et échographiques, est une indication chirurgicale visant à éliminer une grossesse extra-utérine perturbée, le plus souvent par la méthode laparoscopique.

L'absence de contenu obtenu lors de la ponction du creux rétro-utérin n'exclut pas un saignement dans la cavité péritonéale ni l'existence d'une grossesse extra-utérine, notamment lorsque les symptômes indiquent une irritation du péritoine. Le saignement peut être minime ou il peut y avoir des adhérences post-inflammatoires qui empêchent la collecte de matériel à examiner. La présence de liquide sanglant peut également indiquer une endométriose. Le contenu sanglant de la cavité de Douglas peut s'infecter (surinfection), aggravant ainsi l'état de la patiente souffrant d'endométriose. Le traitement comprend l'aspiration du sang hémolysé de la poche de Douglas et l'ablation laparoscopique de l'endométriose.

Examen cytologique du liquide

La détection d'une quantité accrue de liquide péritonéal peut être une raison suffisante pour maintenir une activité oncologique. Le liquide ascitique collecté lors de la ponction de la cavité rétro-utérine doit être envoyé pour un examen cytologique pour confirmer ou exclure une tumeur. La détection de la présence de cellules cancéreuses dans le liquide abdominal fournit des informations précieuses au médecin, car elle peut indiquer l'apparition d'une tumeur maligne primitive des organes génitaux féminins.

Chez les femmes qui ont déjà eu un cancer et qui ont subi une intervention chirurgicale, ce symptôme peut indiquer que le cancer est réapparu. Typiquement, la présence de cellules tumorales dans le liquide péritonéal est associée à une plus grande propagation du cancer gynécologique, ce qui constitue un facteur pronostique défavorable chez ces patientes. Il convient de noter que l'examen cytologique du liquide de la cavité péritonéale n'est qu'une méthode auxiliaire pour identifier les tumeurs malignes de l'ovaire, des trompes de Fallope et du col de l'utérus.

L'examen cytologique du sédiment liquide peut également révéler un nombre accru de cellules inflammatoires, qui apparaissent dans diverses inflammations des organes pelviens. Enfin, l'augmentation des quantités de liquide péritonéal résulte d'autres maladies, telles que la cirrhose du foie ou une insuffisance circulatoire.

Quand faut-il consulter un médecin ?

Les patients doivent consulter immédiatement un médecin si les symptômes suivants apparaissent en plus d'une augmentation du liquide dans la cavité de Douglas :

douleur abdominale,
rapports sexuels douloureux
saignement du tractus génital non associé aux menstruations, saignement de contact,
nausées Vomissements,
augmentation rapide de la circonférence abdominale,
fièvre, frissons,
perte de poids.

Traitement

Le traitement dépend de la cause de la présence de liquide dans l'espace rétro-utérin. Par exemple, si un kyste de l’ovaire se rompt, une intervention chirurgicale est généralement nécessaire pour retirer le kyste. En cas de rupture d'une grossesse extra-utérine, elle doit être retirée par laparoscopie.

En utilisant l'électrophorèse bidimensionnelle et la spectrométrie de masse à temps de vol, le profil protéomique du liquide péritonéal dans l'endométriose génitale externe a été étudié. Des protéines de différence apparaissant dans l'endométriose génitale externe ont été identifiées : apolipoprotéine A-IV, globuline liant les hormones sexuelles, composants du système du complément C3 et C4b. Les protéines absentes dans l'endométriose génitale externe comprennent le facteur de différenciation épithéliale pigmentaire, la transthyrétine, l'haptoglobine, l'α-1-antitrypsine et l'inhibiteur de l'apoptose 6. L'importance possible des protéines identifiées dans le développement des troubles majeurs de l'endométriose est discutée. Les protéines différentielles découvertes peuvent être utilisées comme marqueurs de cette maladie.

endométriose génitale externe

liquide péritonéal

analyse protéomique

différences entre les écureuils

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La pertinence d'étudier l'endométriose génitale externe (EGE) est associée à la forte incidence de cette pathologie chez les femmes en âge de procréer et à son impact significatif sur leur santé reproductive et leur niveau de vie. Actuellement, le rôle important du liquide péritonéal (PF) dans la pathogenèse de l'endométriose a été démontré, car c'est là que se produisent le développement et la croissance des foyers endométrioïdes. L'étude de la composition protéique du pancréas à l'aide de technologies protéomiques visant à étudier la totalité des protéines exprimées par le génome crée des opportunités qualitativement nouvelles pour approfondir la compréhension des mécanismes moléculaires du développement de l'endométriose, sa prédiction et diagnostic précoce.

But du travail. Étudier le spectre protéomique du pancréas des femmes avec et sans NGE.

Matériel et méthodes de recherche

L'étude a inclus 20 patients en âge de procréer ( âge moyen 29,3 ± 0,3 ans), dont 10 patientes atteintes de NGE avec stades III-IV de la maladie selon la classification r-AFS (groupe principal) et 10 sans endométriose (groupe témoin). Le matériel d’étude était le pancréas obtenu à partir de l’espace rétro-utérin lors d’une laparoscopie. L'analyse protéomique du pancréas a été réalisée par électrophorèse bidimensionnelle sur gel de polyacrylamide (appareils Protein IEFCell et ProteanIIxiMulti-Cell, Bio-Rad, USA), suivie d'une coloration des protéines avec des ions argent. L'identification des protéines après leur trypsinolyse a été réalisée par spectrométrie de masse MALDI à temps de vol sur un spectromètre de masse AutoflexII (Bruker, Allemagne) en utilisant le programme MascotMSSearch (MatrixScience, USA) et les bases de données NCBI et Swiss-Prot. l'identification a été acceptée comme fiable au niveau de signification d'au moins 95 % et de couverture de séquence d'au moins 60 %.

L'importance des différences dans le spectre protéomique du pancréas des femmes des groupes témoin et principal a été déterminée à l'aide du test c2 (programme Statistica version 6.0, StatSoft. Jnc.). Les résultats ont été jugés statistiquement significatifs à p<0,05.

Résultats de la recherche et discussion

À la suite de l'analyse protéomique du pancréas, un certain nombre de protéines différentes ont été identifiées, dont la présence ou l'absence ne se produit que dans le NGE (voir tableau, figure). Ainsi, dans le pancréas des femmes du groupe principal, l'apparition des protéines suivantes a été établie : apolipoprotéine A-IV, globuline liant les hormones sexuelles (SHBG), composants du système du complément C3 et C4b, qui n'ont pas été détectés chez les patients de le groupe témoin.

Tableau 1

Protéines pancréatiques identifiées chez les femmes des groupes témoin et principal

	Nom de la protéine
	α-1-antitrypsine
	Facteur de différenciation épithéliale pigmentaire
	Composant du système complémentaire C3
	Apolipoprotéine A-IV
	Haptoglobine
	Globuline liant les hormones sexuelles
	Inhibiteur de l'apoptose 6
	Composant du système complémentaire C4-b
	Transthyrétine

Remarque : pI - point isoélectrique, Mm - poids moléculaire, « + » - présence de protéine, « - » - absence de protéine, p - fiabilité des différences entre les groupes.

UN B

Riz. 1. Cartes protéomiques du liquide péritonéal des femmes des groupes témoin (A) et principal (B)

Note. La numérotation des protéines correspond à celle du tableau

Une augmentation de la production (et, par conséquent, de l'apparition dans le pancréas) de l'apolipoprotéine A-IV, qui possède des propriétés antioxydantes et anti-inflammatoires, a évidemment une valeur compensatoire dans des conditions de stress oxydatif et d'inflammation qui accompagnent le développement de cette pathologie.

L'augmentation des niveaux de SHBG dans l'endométriose, qui régule la biodisponibilité des hormones stéroïdes pour les cellules de l'endomètre, crée les conditions d'une hyperestrogénie locale. Dans ces conditions, il devient possible d’augmenter le potentiel prolifératif des cellules endométrioïdes hétérotopiques.

La sécrétion accrue des composants du système complémentaire C3 et C4b par les macrophages péritonéaux, qui sont impliqués dans la réponse inflammatoire, la neutralisation des cellules apoptotiques et des complexes immuns, apporte une certaine contribution aux mécanismes de développement de l'endométriose et de l'infertilité associée à l'endométriose.

Parallèlement à ces écarts dans la NGE, le spectre protéomique du pancréas manque de 5 protéines : le facteur de différenciation épithéliale pigmentaire, la transthyrétine, l'inhibiteur de l'apoptose 6, l'haptoglobine et l'α-1-antitrypsine.

Le facteur de différenciation épithéliale pigmentaire est l'un des facteurs antiangiogéniques et antiprolifératifs les plus puissants. L'inhibition de son expression peut donc être l'une des raisons conduisant à une diminution de l'apoptose de l'endomètre et à une augmentation de l'angiogenèse, favorisant l'implantation et la croissance des hétérotopies.

L'absence dans le pancréas des femmes du groupe principal de la transthyrétine, qui transporte T3 et T4, crée apparemment un excès local d'hormones thyroïdiennes dont l'effet toxique entraîne des lésions des organes reproducteurs. Les hormones thyroïdiennes, modulant les effets des œstrogènes au niveau cellulaire, peuvent contribuer au développement de troubles de l'histo- et de l'organogenèse des structures hormono-sensibles et à l'aggravation de l'endométriose.

Parmi les protéines non identifiées dans la NGE, un inhibiteur de l'apoptose sécrété par les macrophages joue un rôle important dans la régulation de la réponse immunitaire 6 . C'est peut-être la perturbation de l'expression de cette protéine qui conduit à la formation d'un déséquilibre des cellules immunocompétentes du pancréas (en raison de la suppression de l'apoptose des lymphocytes T et des cellules NK).

L’absence d’haptoglobine, un antioxydant non enzymatique, dans le pancréas peut contribuer à l’augmentation du stress oxydatif qui se développe dans l’endométriose.

Avec cette pathologie, l'α-1-antitrypsine, un inhibiteur des sérine protéases directement impliquées dans les processus d'invasion des cellules de l'endomètre, n'a pas non plus été détectée dans le pancréas, ce qui provoque apparemment un déséquilibre dans le système inhibiteur de protéase, favorisant l'implantation de cellules de l'endomètre.

Des études menées indiquent que le développement de l'endométriose se produit dans le contexte de changements dans la production d'un certain nombre de protéines importantes impliquées dans la régulation de l'action hormonale, l'angiogenèse, l'apoptose, les processus redox, l'inflammation et la réponse immunitaire.

conclusions

1. La modification du spectre protéomique du pancréas est un facteur pathogénétique important dans le développement de la NGE.

2. Les protéines absentes ou apparaissant dans le pancréas lors de l'endométriose peuvent servir de marqueurs informatifs de cette maladie.

Réviseurs :

Avrutskaya V.V., docteur en sciences médicales, chercheur principal du département d'obstétrique et de gynécologie, chef du service ambulatoire de l'institution budgétaire de l'État fédéral « RNIIAP » du ministère de la Santé de Russie. Institution budgétaire de l'État fédéral « Institut de recherche de Rostov en obstétrique et pédiatrie » du ministère de la Santé de Russie, Rostov-sur-le-Don ;

Kaushanskaya L.V., docteur en sciences médicales, chercheur en chef du département d'obstétrique et de gynécologie de l'institution budgétaire de l'État fédéral « RNIIAP » du ministère de la Santé de Russie. Institution budgétaire de l'État fédéral « Institut de recherche de Rostov en obstétrique et pédiatrie » du ministère de la Santé de Russie, Rostov-sur-le-Don.

Lien bibliographique

Tomai L.R., Linde V.A., Ermolova N.V., Gunko V.O., Pogorelova T.N. LE RÔLE DU DÉSÉQUILIBRE PROTÉGIQUE DU LIQUIDE PÉRITONÉAL DANS LA PATHOGÉNÈSE DE L'ENDOMÉTRIOSE GÉNITALE EXTERNE // Problèmes modernes de la science et de l'éducation. – 2014. – n° 6. ;
URL : http://science-education.ru/ru/article/view?id=17171 (date d'accès : 02/01/2020). Nous portons à votre connaissance les magazines édités par la maison d'édition "Académie des Sciences Naturelles"

Le liquide péritonéal est la substance responsable de l’hydratation de la paroi abdominale et des organes de la cavité abdominale.

Il aide à prévenir les frictions entre les organes de la cavité pelvienne lors de leurs mouvements lors de la digestion des aliments.

Ce liquide est constitué d'eau, d'électrolytes, d'anticorps, de globules blancs et de produits biochimiques.

Le liquide péritonéal tire son nom du nom latin du péritoine (péritoine), qui est une membrane séreuse recouvrant les organes internes et les parois de la cavité abdominale. La membrane séreuse est la membrane qui produit le liquide.

Couches de péritoine

Le péritoine, qui produit le liquide péritonéal, est constitué de deux couches. La première couche est le péritoine pariétal, qui se connecte à la paroi de la cavité abdominale. C'est une source de liquide qui hydrate les parois de la cavité abdominale. La deuxième couche est le péritoine viscéral, qui enveloppe les organes internes situés dans la cavité pelvienne. Le liquide péritonéal se forme dans le péritoine viscéral, qui protège les organes abdominaux.

Certains organes abdominaux lubrifiés par le liquide péritonéal comprennent le foie, la rate, la vésicule biliaire, les reins, le pancréas et l'estomac. Sans ce fluide, leur mouvement peut provoquer une irritation dans la zone correspondante du corps. Cela peut conduire à une infection.

Bien que le liquide péritonéal soit extrêmement important, un excès de liquide peut avoir de graves conséquences.

Une production excessive de ce liquide peut être causée par une maladie du foie, une insuffisance cardiaque et un cancer des ovaires, du sein, du côlon, des poumons, de l'estomac et du pancréas. Le terme ascite est utilisé pour décrire la présence d’un excès de liquide dans la cavité abdominale.

Symptômes d'un excès de liquide péritonéal

En raison de la gravité des maladies associées à un excès de liquide péritonéal, il est très important de reconnaître les symptômes de cette affection. Certains des symptômes courants comprennent des ballonnements, des difficultés respiratoires, une sensation de lourdeur ou de plénitude, des jambes enflées et du sang dans les vomissures. Pour ceux qui pourraient avoir un cancer, les symptômes comprennent également une perte de poids importante et de la fatigue.

La première étape pour diagnostiquer la présence d’un excès de liquide péritonéal est généralement un examen physique effectué par un médecin. Si cette condition est suspectée, une échographie ou une tomodensitométrie peut être demandée. Certaines procédures plus invasives pour confirmer la présence d'un excès de liquide péritonéal comprennent une biopsie du foie ou le retrait d'une partie du liquide à des fins de test.

Traitement de l'excès de liquide péritonéal

Le traitement de l'excès de volume de liquide péritonéal peut inclure des diurétiques pour réduire la pression qu'il exerce. Les patients atteints de cette maladie doivent également réduire leur consommation de sel, ce qui aide généralement à gérer la rétention d'eau dans le corps. Dans certains cas, une certaine quantité de liquide péritonéal est prélevée à l'aide d'une seringue ou d'un shunt. En cas d'infection, des antibiotiques peuvent être nécessaires.

UDC 579.842.23+ 616-092.19

T.P. Starovoitova, T.A. Ivanova, G.B. Mukhturgin, S.A. Vityazeva, V.I. Doubrovina,

K.M. Korytov, S.V. Balakhonov

CHANGEMENTS DANS LA COMPOSITION CELLULAIRE DU LIQUIDE PÉRITONÉAL DE SOURIS BLANCHES PENDANT LE PROCESSUS D'INFECTION CAUSÉ PAR YERSINIA PESTIS AVEC DIFFÉRENTES COMPOSITIONS PLASMIDIQUES

Institut de recherche anti-peste d'Irkoutsk de Sibérie et d'Extrême-Orient (Irkoutsk)

L'article présente des données sur l'influence de la composition plasmidique du microbe de la peste sur la composition de la sous-population de cellules mononucléées dans le liquide péritonéal de souris blanches aux premiers stades du processus infectieux. Il a été démontré que les modifications de la composition cellulaire du liquide péritonéal des animaux de laboratoire dépendent du profil plasmidique des souches microbiennes de la peste. L'expérience a également révélé un schéma de phase dans les changements dans la composition quantitative des mastocytes dans le liquide péritonéal de souris blanches infectées par des souches de Yersinia pestis avec différents spectres plasmidiques. Mots clés : Yersinia pestis, liquide péritonéal, virulence

MODIFICATIONS DES COMPOSANTS CELLULAIRES DU LIQUIDE PÉRITONÉAL DE SOURIS BLANCHES AVEC INFECTION CAUSÉE PAR YERSINIA PESTIS AVEC UN PROFIL PLASMIDIQUE DIFFÉRENT

T.P. Starovoytova, T.A. Ivanova, G.B. Mukhturgin, S.A. Vityazeva, V.I. Doubrovina,

K.M. Korytov, S.V. Balakhonov

Institut de recherche antipeste d'Irkoutsk de Sibérie et d'Extrême-Orient, Irkoutsk

L'article présente les données sur l'influence du profil plasmidique de Yersinia pestis sur la structure des sous-populations de cellules mononucléées du liquide péritonéal de souris aux premiers stades du processus infectieux. Il a été démontré que le changement de la composition cellulaire du liquide péritonéal des animaux de laboratoire dépendait du profil plasmidique des souches de Yersinia pestis. Le caractère de phase dans les changements de composition quantitative des mastocytes du liquide péritonéal de souris blanches infectées par des souches de Y. pestis avec un spectre plasmidique différent a été déterminé. Mots clés : Yersinia pestis, liquide péritonéal, virulence

La grande majorité des facteurs de virulence de Yersinia pestis sont liés aux plasmides. Le génome de l'agent causal de la peste de la sous-espèce principale - Yersinia pestis sous-espèce pestis - comporte trois plasmides - pYU(45MDa), pYP(6MNa) et pYT(61MDa), leur rôle est bien étudié dans la mise en œuvre des propriétés pathogènes de Yersinia. . Avec la présence du plasmide pYV, les souches de Yersinia présentent de nombreuses caractéristiques phénotypiques : adhésion cellulaire, autoagglutination, agglutination de surface, ainsi que synthèse de protéines de la membrane externe, notamment des antigènes V et W et d'autres protéines, dont l'action vise à supprimer l'activité phagocytaire des systèmes de cellules immunitaires. Les plasmides pYP et pYT sont spécifiques d'une espèce. Le plasmide pYP détermine la synthèse de la bactériocine pesticine 1 et de l'activateur du plasminogène, et le plasmide pYT code pour les deux facteurs de virulence les plus étudiés : la toxine de souris et les capsules F1. Une caractéristique distinctive de l'agent pathogène circulant dans l'épidémie de Touva est la présence dans son génome d'un quatrième plasmide pTRZZ supplémentaire dont les fonctions sont encore peu claires. On pense que ce plasmide est une version génétiquement modifiée d'un plasmide résident de 9,5 kD portant les gènes pla (activateur du plasminogène) et pstl (pesticine 1). La perte du plasmide entraîne des modifications des propriétés biochimiques et culturelles, ainsi qu'une diminution ou une perte totale de la virulence de l'agent pathogène.

Le principal signe clinique d'infection pesteuse et d'intoxication, qui détermine la gravité de l'évolution

et le résultat de la maladie est une violation de l'homéostasie du macroorganisme. Les principales cibles des endotoxines sont les leucocytes polymorphonucléaires, les macrophages, les monocytes, les cellules endothéliales et d'autres éléments cellulaires. Les modifications de la composition cellulaire du liquide péritonéal peuvent être considérées comme un critère diagnostique de la gravité de la maladie dans de nombreuses maladies, notamment la peste. À cet égard, l'évaluation de la composition cellulaire quantitative et qualitative du liquide péritonéal chez la souris blanche au cours du processus infectieux provoqué par Y. pestis avec une composition plasmidique différente présente un grand intérêt.

Objectif du travail : étudier la dynamique des changements dans la composition des sous-populations de cellules mononucléées dans le liquide péritonéal de souris blanches aux premiers stades de l'infection pesteuse expérimentale.

MATÉRIELS ET MÉTHODES

Le modèle expérimental dans les expériences était constitué de 175 souris blanches des deux sexes, non consanguines, mais standard en termes de conditions de détention et de poids (18-20 g). Les animaux ont été retirés de l'expérience conformément aux « Règles de pratique de laboratoire dans la Fédération de Russie », approuvées par l'arrêté du ministère de la Santé de la Fédération de Russie n° 267 du 19 juin 2003, et à la norme nationale de la Fédération de Russie. GOST R 53434-2009 « Principes de bonnes pratiques de laboratoire ».

Nous avons utilisé 6 souches de Y. pestis subsp. pestis et Y. pestis subsp. altaica de la collection du Musée d'Ir-

Tableau 1

Caractéristiques des souches testées du microbe de la peste

Souche Lieu d'isolement Composition plasmidique Virulence pour les souris blanches ^Obo), m.c.

Y. pestis subsp. pestis I-2638 Tuvan foyer naturel de peste pYP+pYV+pTP33+pYT+ 10 / hautement virulent

Y. pestis subsp. pestis I-3479 Institut anti-peste d'Irkoutsk pYP+pYV-pTP33+pYT+ avirulent

Y. pestis subsp. pestis I-3480 Institut anti-peste d'Irkoutsk pYP-pYV-pTP33+pYT+ avirulent

Y. pestis subsp. altaica I-2359 Épidémie naturelle de peste du Gorno-Altaï pYP+pYV+pYT+ 4 x 104/légèrement virulent

Y. pestis subsp. altaica I-2948 Foyer naturel de peste Gorno-Altaï pYP-pYV+pYT+ 3 x 108/virulence résiduelle

Y. pestis subsp. altaica I-2948/3 Institut anti-peste d'Irkoutsk pYP-pYV-pYT+ avirulent

Institut anti-peste Kut Research de Rospotrebnadzor (tableau 1).

Les souris blanches intactes ont été divisées en 6 groupes expérimentaux et 1 groupe témoin de 25 individus chacun. Les animaux des groupes expérimentaux ont été infectés par Y. pestis à une concentration de 1 x 106 mc dans un volume de 0,5 ml par la méthode intrapéritonéale. Le premier groupe expérimental d'animaux a reçu une injection d'une culture de deux jours de la sous-espèce Y. pestis cultivée à une température de 28 °C. pestis I-2638, groupe II - Y. pestis subsp. pestis I-3479, groupe III - Y. pestis subsp. pestis I-3480, le groupe expérimental IV d'animaux a été infecté par la souche de référence Gorno-Altai Y pestis subsp. altaica I-2359, groupe V - Y. pestis subsp. altaica I-2948, groupe VI - souche de sélection Y. pestis subsp. altaica I-2948/3.

Le matériel provenant d'animaux de laboratoire (liquide péritonéal) a été collecté après 30, 60, 90, 120 et 180 minutes. Le nombre total de cellules nucléaires dans 1 ml de liquide péritonéal a été compté dans des préparations fixes colorées selon des méthodes standards. Pour l'analyse bactériologique, du sang provenant du cœur et du liquide péritonéal (0,1 ml chacun) ont été inoculés sur un milieu nutritif solide (gélose Hottinger, pH 7,2).

Des méthodes de microscopie d'enquête ont été utilisées dans ce travail. L'évaluation quantitative du nombre total de leucocytes a été réalisée à l'aide d'une méthode de comptage cellulaire unifiée dans la chambre Goryaev. Le pourcentage des différents types de leucocytes a été déterminé par examen morphologique du liquide péritonéal dans des frottis. Lors de l'étude des préparations à l'aide du programme informatique « MoticImagesPlus » (version 2), un dénombrement différencié des basophiles tissulaires (TB) a été réalisé et leur diamètre et leur surface ont été mesurés. Le degré d'activation des mastocytes a été évalué par l'indice de dégranulation cellulaire (CDI) - le pourcentage de mastos basophiles dégranulés par rapport à leur nombre total.

L'analyse automatique des images a été réalisée à l'aide d'un microscope optique Zeiss (Allemagne) avec une caméra vidéo Moticam 2000, résolution 1392 x 1040 pixels, env. 10, tome. 100.

La signification des résultats de la recherche a été obtenue par des méthodes mathématiques de traitement statistique utilisant une analyse comparative utilisant le test t de Student et en utilisant le programme informatique Statistica, version 6.0 (StatSoft Inc. 19842001, IPCI 31415926535897) et le progiciel

Microsoft Office Excel (2003). Les résultats ont été considérés comme significatifs par rapport au contrôle à p< 0,05.

RÉSULTATS ET DISCUSSION

Le nombre total de cellules dans le liquide péritonéal chez les animaux intacts est de 4,3 ± 0,9 x 103 pour 1 cm3, les macrophages étant le type cellulaire prédominant et représentant 60,5 ± 5,6 % du nombre total de cellules, et les lymphocytes représentant 17,0 ± 2,8. % ; 5,5 ± 0,8 % sont des cellules mésothéliales et d'autres éléments cellulaires.

Chez les souris blanches infectées, des changements phasiques du nombre total de cellules nucléées sont observés. Chez les animaux infectés par une souche virulente de Y. pestis subsp. pestis I-2638, après 30 minutes, le nombre total de cellules nucléaires augmente fortement jusqu'à 1,5 ± 0,4 x 104 pour 1 cm3, soit 3,4 fois plus élevé que chez les animaux intacts. Après 60 minutes d'étude, les indicateurs diminuent jusqu'à des valeurs intactes, continuant de diminuer au cours des périodes suivantes. Le tableau cytologique du liquide péritonéal est clairement lié à la culture infectante. Chez les animaux du groupe I, 30 minutes après l'infection, une augmentation du nombre de lymphocytes a été observée, dépassant de 4 fois la valeur chez les animaux intacts en raison d'une forte diminution du nombre de monocytes. Ces changements ont été détectés pendant toutes les périodes d'observation. Dans le liquide péritonéal de souris blanches infectées par Y. pestis subsp. pestis I-2638, 120 minutes après le début de l'expérience, une multiplication par 2,5 du nombre de neutrophiles segmentés a été enregistrée par rapport au contrôle (p< 0,05), и незначительное увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов. На последнем сроке исследования в мазках перитонеальной жидкости выявляется большое количество фибробластов, агрегация лимфоцитов и большое количество делящихся клеток.

Chez des souris blanches infectées par Y. pestis subsp. altaica I-2359, Y. pestis subsp. pestis I-3479 et Y. pestis subsp. altaica I-2948/3, 30 minutes après le début de l'expérience, aucun changement statistiquement significatif n'a été observé. Au bout de 180 minutes, le nombre de cellules nucléaires dans l'exsudat péritonéal dépasse de 2,8 les valeurs de contrôle (p< 0,01), 1,9 (р < 0,05) и 1,5 раза соответственно. При введении животным Y. pestis subsp. pestis И-3480 и Y. pestis subsp. altaica И-2948 через 30 мин отмечается повышение общего числа ядерных клеток с последующим снижением (120 мин) до уровня контроля, и к 180 мин показатель вновь увеличивается.

Lors de l'examen de frottis de liquide péritonéal chez les animaux de tous les groupes expérimentaux, une prolifération cellulaire de lymphocytes, d'histiocytes, une augmentation des éosinophiles, des basophiles tissulaires, des plasmocytes, des cellules mésothéliales et des fibroblastes sont enregistrées.

L'évaluation des propriétés morphologiques des basophiles, de leur nombre et de leur activité fonctionnelle est intéressante lors de l'étude de la composition cellulaire du liquide péritonéal d'animaux infectés.

Il a été établi que chez les souris blanches expérimentales, il existe un schéma de phase dans les changements dans la composition quantitative des basophiles tissulaires dans le liquide péritonéal. Une augmentation de leur nombre chez les animaux infectés par Y. pestis subsp. pestis I-2638, est enregistré 60 minutes après l'introduction de la culture, dépassant de 2,6 fois les valeurs chez les animaux intacts (p< 0,05). Затем данные показатели снижаются (90-120 мин) до значений ин-тактных животных, к 180 мин вновь возрастают, достигая значений 8,5 против 2,5 в контроле (р < 0,05). Часть ТК представлены интестинальными - незрелыми формами (рис. 1), появление которых можно расценивать как процесс компенсации.

Riz. 1. Souris blanche infectée par Y. pestis subsp. pestis I-2638. Liquide péritonéal. Mastocytes intestinaux. Coloration selon Romanovsky - Giemsa, uv. x100.

Dans les premiers stades de l'étude, les TC atypiques représentaient 21,0 ± 1,8 % du nombre total de TC ; aux dernières étapes, ces chiffres sont passés à 25,2 ± 2,1 %. Les TC atypiques ont un potentiel fonctionnel minimal et sont nettement plus petits. Le diamètre des cellules est de 6,8 à 8,6 microns, ce qui est en moyenne 2,3 fois inférieur (p< 0,05), по сравнению с диаметром типичных ТК. Таких клеток значительно меньше в перитонеальной жидкости белых мышей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2359, и только в период 120-180 мин после заражения отмечаются единичные интестинальные тканевые базофилы. У животных других опытных групп атипичные ТК не выявляются.

En général, l'activation du système TC reflète la restructuration adaptative générale de l'organisme en réponse à l'introduction d'un antigène. La dégranulation des basophiles tissulaires se produit le long du trajet de l'exocytose granulaire entière (Fig. 2). L'activité fonctionnelle des basophiles tissulaires dans le liquide péritonéal des animaux de laboratoire a un caractère de phase. L'IDTK le plus élevé est noté

chez la souris blanche 60 min après l'infection par Y. pestis subsp. pestis I-2638 - 3,9 ± 0,6, soit 18,5 fois (p< 0,01) выше значения у интактных животных, затем показатель резко снижается, но к 180 мин исследований он вновь повышается, превышая значение в контрольной группе в 4,4 раза (р < 0,01). У селекционных клонов Y. pestis subsp. pestis И-3479 и И-3480 максимальное значение индекса дегрануляции имеет место через 90 мин от начала опыта и составляет 2,0 ± 0,3 и 1,3 ± 0,4 соответственно, при этом у белых мышей II опытной группы показатели во все сроки исследования были выше, чем у животных III опытной группы.

Riz. 2. Souris blanche infectée par Y. pestis subsp. pestis I-2638. Liquide péritonéal. Mastocytes. Dégranulation. Coloration selon Romanovsky - Giemsa, uv. x100.

Le caractère de phase le plus prononcé des modifications des basophiles tissulaires est observé chez les souris blanches du groupe expérimental IV. La valeur IDTK maximale se produit dans les deuxième et quatrième étapes de l'étude, dépassant les valeurs des animaux intacts de 5,8 et 7,4 fois (p< 0,05) соответственно. У особей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2948/3, только на двух сроках исследования (60-90 мин) регистрируется увеличение дегрануляции тучных клеток в 3,6 и 2,6 раза соответственно (р < 0,05), в другие сроки данные статистически не значимы. У белых мышей V опытной группы максимальное значение ИДТК приходится на второй и последний срок исследования - 0,99 и 0,92 у. е., при в контроле отмечается 0,21 у. е.

CONCLUSION

Ainsi, le développement du processus infectieux dans les premières heures après l'inoculation de l'agent pathogène de la peste dépend de son profil plasmidique, puisque les changements les plus prononcés dans la composition cellulaire quantitative et qualitative du liquide péritonéal ont été détectés chez des animaux de laboratoire infectés par des souches contenant pYP+pYV+pYT+.

Le schéma de phase révélé au cours de l'expérience par des changements dans la composition quantitative des mastocytes dans le liquide péritonéal, en particulier chez les individus infectés par la souche virulente de Y. pestis subsp. pestis I-2638 (pYP+pYV+pTP33+pYT+), ainsi que la présence de formes immatures et atypiques de MC indiquent le développement de processus de compensation.

En général, l'activation du système mastocytaire reflète la restructuration adaptative générale de l'organisme en réponse à l'introduction d'un antigène.

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Le liquide séreux normal de la cavité abdominale est clair et jaune clair, son volume est inférieur à 50 ml. Si du liquide s’accumule dans la cavité abdominale en quantités importantes, on parle d’ascite. L'ascite est une hydropisie abdominale, une hydropisie de l'abdomen, une accumulation importante de liquide libre (généralement transsudat) dans la cavité abdominale. L'ascite peut survenir soudainement (par exemple en cas de thrombose de la veine porte) ou se développer progressivement sur plusieurs mois, accompagnée de flatulences, qui peuvent initialement dominer le tableau clinique. Parfois, 8 à 30 litres de liquide d'ascite s'accumulent dans la cavité péritonéale. Lors d'un examen physique du patient, une ascite peut être reconnue s'il y a au moins 1 litre de liquide dans la cavité péritonéale.

OBTENTION ET TRAITEMENT DE MATÉRIEL POUR LA RECHERCHE EN LABORATOIRE
Le liquide séreux de la cavité abdominale est obtenu par ponction de la cavité recto-utérine (poche de Douglas, poche) (culdocentèse), par ponction percutanée (paracentèse) ou par laparoscopie.

Dans le même temps, 5 ml de sang veineux doivent être collectés pour déterminer le gradient sérique-liquide d'ascite pour l'albumine et d'autres paramètres biochimiques.

Il est conseillé de réaliser un examen cytologique du liquide d'ascite immédiatement après la livraison de l'échantillon au laboratoire. Si une analyse d’urgence n’est pas possible, l’échantillon doit être conservé au réfrigérateur pendant 12 heures maximum en utilisant de l’héparine ou du citrate de sodium comme anticoagulant.

VALEUR CLINIQUE ET DIAGNOSTIQUE DES CHANGEMENTS DES INDICATEURS DU LIQUIDE SÉROUSAL DANS LA CAVITÉ ABDOMINALE
Les principaux objectifs de l’analyse en laboratoire du liquide d’ascite sont :
établir le caractère bénin ou malin de l'épanchement ;
différenciation fluide non infecté/infecté.

L'ascite dans l'hypertension portale, le cancer hépatocellulaire et les métastases hépatiques sans propagation dans tout le péritoine est un transsudat.

L'ascite dans les maladies du foie, dans les cas de pancréatite, de tuberculose péritonéale et dans les tumeurs malignes avec métastases dans le péritoine est généralement le résultat d'un exsudat.

Des critères de laboratoire appropriés ont été développés pour le diagnostic différentiel des types d'ascite portale et maligne (métastases péritonéales). Les principaux indicateurs de laboratoire de la division de l'ascite en exsudat et transsudat en l'absence de cellules malignes sont la teneur en albumine, les taux de cholestérol et de fibronectine. Le transsudat est caractérisé par un gradient élevé d'albumine entre le sérum et le liquide d'ascite (> 11 g/l); pour l'exsudat, au contraire, le liquide d'ascite contient une grande quantité d'albumine et le gradient d'albumine entre le liquide d'ascite et le sérum est insignifiant (
Dans le cas du liquide d'ascite chyleux, la détermination des triglycérides et l'électrophorèse des lipoprotéines sont indiquées. Un taux d'antigène carcinoembryonnaire supérieur à 2,5 µg/l de liquide d'ascite a une spécificité clinique élevée et une valeur pronostique proche de 100 % pour une tumeur avec métastases péritoine.

Lors du test de l'albumine, des échantillons de sérum et de liquide d'ascite doivent être prélevés en même temps. La concentration d'albumine dans le liquide d'ascite doit être déterminée par des méthodes immunonéphélométriques ou immunoturbidimétriques. La détermination photométrique de l'albumine avec le vert de bromocrésol donne des résultats gonflés à des concentrations d'albumine supérieures à 7 g/l, cette méthode n'est donc pas adaptée pour déterminer le gradient d'albumine. Un taux de protéines totales supérieur à 30 g/L pour le diagnostic de transsudat a une spécificité diagnostique de 86 % et une spécificité diagnostique de 83 %.

Le comptage cellulaire et la différenciation pour déterminer les granulocytes neutrophiles sont effectués dans le liquide ascitique EDTA. Si du sang est présent dans l’échantillon, il est alors nécessaire de déterminer :
le rapport globules rouges/globules blancs pour évaluer la possibilité de saignement du tractus gastro-intestinal ou de mélange de sang « de voyage » ;
nombre de leucocytes (élevé Montant relatif indique un processus inflammatoire);
le contenu en granulocytes neutrophiles (les ascites avec une prédominance et une teneur absolue en neutrophiles supérieures à 250/μl sont classées comme infectieuses).

Si un examen cytologique ne peut être effectué dans les 12 heures, l'échantillon peut être conservé au réfrigérateur jusqu'à 2 jours, mais le matériau doit être fixé en ajoutant 50 % d'alcool dans un rapport de 1:1.
La détermination de la microflore pathogène dans le liquide d'ascite est effectuée de la même manière que dans le sang - par culture dans des conditions aérobies et anaérobies.

PROPRIÉTÉS GÉNÉRALES (VUE MACROSCOPIQUE DU LIQUIDE)
Le liquide ascitique (péritonéal) est souvent de nature séreuse, moins souvent hémorragique, chyleux et muqueux. Le liquide ascitique clair, transparent ou teinté jaunâtre est souvent un transsudat. Le liquide séreux trouble est caractéristique de la péritonite, qui survient comme complication d'une appendicite, d'une pancréatite, d'une occlusion intestinale ou d'une infection bactérienne primaire. Couleur verdâtre, la coloration de la bile se produit lorsque la vésicule biliaire ou le bulbe est perforé duodénum, l'intestin grêle, ainsi que la cholécystite, la pancréatite aiguë. Le liquide ascitique acquiert une couleur verdâtre lorsque la concentration de bilirubine dépasse 100 µmol/l. Si la concentration de bilirubine dans le liquide d'ascite est plus élevée que dans le sérum, cela indique une perforation des voies biliaires ou de la vessie. L'aspect laiteux du liquide séreux (épanchement chyleux) apparaît lorsqu'il y a un grand nombre de chylomicrons dans le liquide ascitique. Cela se produit le plus souvent en cas de lésion ou d'obstruction du canal lymphatique thoracique provoqué par la tuberculose, la cirrhose du foie et peut survenir en cas de leucémie (lymphome). La perfusion de pseudochyle est possible lorsque de grands volumes de substituts sanguins sont administrés aux patients.

Du liquide séreux hémorragique de la cavité abdominale peut apparaître en cas de traumatisme abdominal avec rupture des organes internes, notamment en cas de rupture trompe de Fallope en cas de grossesse extra-utérine, ainsi qu'en cas de dissémination d'une tumeur maligne le long de la membrane séreuse. Le liquide a une couleur écarlate en raison du mélange de sang « de voyage » lors de la paracentèse. Le liquide ascitique acquiert une couleur brune en raison d'un saignement dans la cavité abdominale lors d'une péritonite tuberculeuse, de métastases au péritoine et après des lésions traumatiques des organes abdominaux. Dans l'évaluation intégrale de l'état des patients atteints de péritonite, on utilise l'indice péritonéal de Mannheim, dans le calcul duquel l'un des indicateurs les plus significatifs est la nature de l'exsudat.

INDICATEURS BIOCHIMIQUES
La concentration de protéines totales dans le liquide d'ascite est principalement influencée par les facteurs suivants :
la concentration de protéines totales dans le sérum sanguin, avec laquelle le niveau de protéines dans le liquide d'ascite a une relation directe ;
niveau d'hypertension portale, qui a une relation inverse. De plus, la concentration de protéines totales dans le liquide d’ascite est affectée par
prendre des diurétiques.

Les indications pour déterminer les protéines totales dans le liquide d'ascite sont :
administration prophylactique d'antibiotiques pour prévenir la péritonite bactérienne ;
diagnostic différentiel des péritonites bactériennes primaires et secondaires (introduites);
ascite dans l'insuffisance cardiaque.

Protéines totales
À une valeur seuil de la teneur totale en protéines dans le liquide d'ascite de 25 g/l, les idées classiques sur la séparation du transsudat et de l'exsudat sur la base de l'exsudation protéique ne sont confirmées qu'à 56 %, c'est-à-dire qu'elles n'ont pratiquement aucune confirmation en laboratoire. Cela est dû au fait que la teneur totale en protéines est faible avec l'étiologie infectieuse de l'ascite, bien que le caractère exsudatif de l'ascite soit indéniable. En revanche, la teneur totale en protéines du liquide d'ascite est élevée chez les patients souffrant d'insuffisance cardiaque, chez lesquels le liquide d'ascite est considéré comme un transsudat.

Une concentration totale en protéines supérieure à 30 g/L indique un exsudat, avec une sensibilité clinique de 93 % et une spécificité de 85 %. Une valeur de rapport protéique supérieure à °-5 indique un exsudat avec une sensibilité clinique de 93 % et une spécificité de 85 %. Dans l'ascite provoquée par des tumeurs malignes, à l'exception du cancer hépatocellulaire, la concentration de protéines totales est de 49 à 65 g/l, tandis que dans la cirrhose du foie et le cancer hépatocellulaire, elle est de l'ordre de 17 à 21 g/l. Les patients présentant une cirrhose du foie et des taux de protéines dans le liquide d'ascite inférieurs à 15 g/l ont un mauvais pronostic. Un faible niveau de protéines dans le liquide d'ascite est caractéristique du caractère infectieux de l'ascite, tandis qu'en même temps, en cas d'infection bactérienne secondaire et de péritonite tuberculeuse, un niveau de protéines supérieur à 30 g/l est constamment déterminé dans le liquide d'ascite.

Albumen
Le gradient d'albumine entre le sérum et le liquide d'ascite est déterminé par le niveau d'hypertension portale. Les patients avec un gradient d'albumine supérieur à 11 g/l souffrent d'hypertension portale, mais pas ceux avec un gradient inférieur à 11 g/l. Dans la cirrhose du foie avec hypertension portale, un gradient d'albumine supérieur à 11 g/l a une spécificité clinique de 97 %. Les ascites de types mixtes - dues à une cirrhose du foie et à des métastases du péritoine ou à une cirrhose du foie et à une péritonite tuberculeuse - s'accompagnent également d'un gradient d'albumine supérieur à 11 g/l.

Pour distinguer le transsudat de l'exsudat, le gradient d'albumine est plus important que la protéine totale. Il convient de garder à l'esprit que lors de l'utilisation de diurétiques ou de paracentèse, les niveaux d'albumine et de protéines totales dans le liquide d'ascite changent.

Chez les patients atteints de péritonite généralisée, le degré de diminution de la concentration sérique d'albumine est un indicateur pronostique très informatif qui permet d'évaluer la gravité de la maladie et le risque d'évolution défavorable. Une diminution du taux d'albumine dans le sang se produit à la fois en raison d'une augmentation du catabolisme protéique, caractéristique de la phase aiguë de tout processus inflammatoire, et en raison de l'exsudation dans la cavité abdominale. L'exsudat péritonéal contient une quantité importante de protéines. On pense que jusqu'à 50 % de tout le liquide extracellulaire du corps peut pénétrer dans la cavité abdominale. Avec le développement de l'œdème, le processus d'absorption des liquides par le péritoine s'accélère même au début, mais ensuite, en raison d'une violation de la microcirculation, il ralentit fortement - l'exsudat s'accumule. Une certaine quantité de protéines, y compris l'albumine, libérées par la circulation sanguine, est perdue dans l'organisme ; un épanchement riche en protéines conduit à une hypoalbuminémie. De plus, un gonflement important du tissu pré- et rétropéritonéal et d'autres tissus se produit toujours en raison de l'action de substances biologiquement actives : enzymes, kinines, histamine, grâce auxquelles l'albumine se dépose dans les tissus. Parallèlement à une diminution de la synthèse (l'albumine est un réactif négatif de la phase aiguë de l'inflammation) et à une augmentation de la décomposition (la prédominance des processus cataboliques dans le corps), la libération d'albumine dans la cavité abdominale et son dépôt dans les tissus œdémateux sont la principale cause du phénomène pronostiquement défavorable est une diminution de la concentration d'albumine dans le sérum sanguin.

La pénétration de l'albumine du sang dans l'épanchement est caractérisée par la valeur de la concentration totale d'albumine dans l'épanchement. Dans la plupart des cas, la concentration d'albumine totale dans l'épanchement est en étroite corrélation avec la valeur de la concentration d'albumine totale dans l'épanchement (concentration d'albumine dans le sérum sanguin). Dans les cas où la concentration totale d'albumine d'épanchement est > 34 g/L et la concentration totale d'albumine d'épanchement est significativement inférieure à la concentration totale d'albumine d'épanchement, les patients ont une évolution postopératoire légère ; l'évolution de la maladie est favorable ; le débit de drainage est insignifiant.

En cas de différences significatives dans le statut de l'albumine dans l'épanchement et dans le sérum, la valeur de la concentration totale d'albumine dans l'épanchement n'est pas liée à la concentration d'albumine dans le sang ; De toute évidence, il existe un effet protéolytique sur l'albumine dans l'exsudat, conduisant à sa modification et à sa destruction. Dans d'autres cas, la valeur absolue de la concentration totale d'albumine dans l'épanchement dépend de la valeur de la concentration totale d'albumine dans l'épanchement, et non de l'activité du processus inflammatoire dans la cavité abdominale. Pour caractériser la gravité du processus inflammatoire dans la cavité abdominale, le rapport entre la concentration totale d'albumine dans l'épanchement, qui caractérise le degré de perméabilité de la paroi vasculaire à l'albumine, convient. Le paramètre de la concentration totale d'albumine dans l'épanchement reflète la gravité de l'état du patient, et le paramètre de la concentration totale d'albumine dans l'épanchement reflète la gravité du processus inflammatoire dans la cavité abdominale.

Endotoxine
Chez les patients présentant une péritonite fécale (perforation du côlon), la concentration d'endotoxine dans le liquide péritonéal peut atteindre 1 000 mcg/l. Dans la péritonite bactérienne diffuse, les concentrations d'endotoxines sont généralement relativement faibles. Si dans période postopératoire La microflore du côlon continue de pénétrer dans la cavité abdominale (l'endotoxine dans le liquide péritonéal augmente), ce qui constitue une très grande menace de péritonite diffuse et de décès du patient.

Glucose
Dans la péritonite non bactérienne, le rapport glucose-liquide d'ascite/glucose plasmatique est supérieur à 1 ; dans la péritonite bactérienne, cette valeur est inférieure à 1. Une concentration de glucose dans le liquide d'ascite inférieure à 2,8 mmol/l est caractéristique d'une péritonite bactérienne. Dans la plupart des cas de péritonite tuberculeuse, la concentration de glucose dans le liquide d'ascite est inférieure à 1,7 mmol/l. Elle est également réduite dans les tumeurs malignes avec métastases, qui sont à l'origine de l'ascite.

ÉTUDE BACTÉRIOLOGIQUE
Lorsque le liquide péritonéal est infecté par une monoculture, les études culturelles ont une sensibilité clinique de plus de 85 à 90 %, alors qu'en même temps, un indicateur tel que la teneur en granulocytes neutrophiles/μl supérieure à 250 n'est que de 50 %. Des études bactériologiques montrent que dans 70 % des cas, il existe une microflore à Gram négatif, généralement E. coli, dans 20 % des cas, à Gram positif.

Signification étiologique micro-organismes anaérobies prouvé pour toutes les infections intra-abdominales compliquées, où elles font partie d’associations polymicrobiennes. Clostridium perfringens et Clostridium septicum sont impliqués dans le développement de péritonites secondaires, d'abcès intra-abdominaux et de sepsis lors de la perforation du côlon et de l'iléon terminal. Avec les tumeurs compliquées du côlon, 70 à 85 % des patients présentent une bactériémie causée par Clostridium septicum. Dans l'appendicite, Bilophila wadsworthia est isolée du liquide d'épanchement. Les infections mixtes impliquent souvent Peptococcus spp., Peptostreptococcus spp. Survenant dans 90 à 95 % des cas, Actinomyces spp., Prevotella spp., Lactobacillus spp., Fusobacterium spp. le plus difficile dans le diagnostic et le traitement des abcès hépatiques actinomycotiques. Les Bacteroides, principalement Bacteroides fragilis et Bacteroides thetaiotaomicron, jouent un rôle majeur dans les infections intra-abdominales. La fréquence d'isolement de Bacteroides fragilis dans la péritonite secondaire atteint 22,8 à 44,5 %. Il existe des preuves de l'importance étiologique des bactéries anaérobies dans la péritonite primaire. Chez tous les patients présentant des infections des voies biliaires présentant des signes d'hypertension biliaire ou des endoprothèses assurant la perméabilité du canal biliaire principal, Clostridium perfringens et Bacteroides fragilis sont isolés. Dans la pancréatite, les bactéroïdes et les clostridies font partie des agents pathogènes isolés dans 5 à 14 % des cas. En cas d'infection nosocomiale intra-abdominale, l'association d'entérobactéries multirésistantes, Pseudomonas aeruginosa, d'entérocoques et d'anaérobies est significative. Les infections des plaies chez les patients après des interventions abdominales sont causées dans 3,9 % par des Bacteroides spp., dans 1,1 % par Clostridium perfringens. Le développement de la péritonite et la mortalité lors d'une infection intra-abdominale sont causés par des aérobies à Gram négatif, et la formation d'abcès intra-abdominaux chez les survivants est causée par la microflore anaérobie.

Un processus inflammatoire microbien progressif dans la cavité abdominale (dans le contexte d'un traumatisme chirurgical, d'une diminution de la résistance du corps, etc.) se déroule très rapidement et peut atteindre en 4 à 5 jours un stade nécessitant intervention chirurgicale. Le dynamisme du processus, la forte probabilité de réinfection et le développement de résistances de la microflore nécessitent à la fois la prescription empirique d'une antibiothérapie simultanément à une analyse microbiologique expresse indicative (microscopie, chromatographie en phase gazeuse) et l'évaluation de la sensibilité des micro-organismes du matériel clinique à l'aide de disques. avec des antibiotiques et une surveillance constante de la situation bactériologique au site de l'inflammation. La méthode de culture bactériologique de routine permet d'obtenir des résultats 24 à 72 heures après le début de l'étude, d'identifier la nature de la microflore pathogène, de confirmer le bon choix d'antibiothérapie ou de suggérer la nécessité de sa correction. Une surveillance microbiologique constante est nécessaire car la situation microbiologique sur le site de l'infection peut changer considérablement au cours du processus pathologique et nécessiter des changements de traitement.

ÉTUDE DE CELLULES SANGUINES
Globules rouges dans le liquide d'ascite EDTA
Le liquide de lavage péritonéal contient moins de 25 000 globules rouges/µl. Dans le liquide ascitique, les globules rouges s'accumulent après des blessures ou sont une manifestation de lésions tuberculeuses ou malignes du péritoine. Un rapport similaire de globules rouges et blancs dans le liquide d'ascite et le sang indique une lésion iatrogène (passage de sang) ou un saignement dans la cavité abdominale.

Leucocytes
La détermination des leucocytes dans le liquide péritonéal peut être effectuée quantitativement par comptage dans la chambre Goryaev ou semi-quantitativement - à l'aide de bandelettes de diagnostic utilisant une zone de test pour déterminer les leucocytes. La sensibilité de la zone test pour les leucocytes est de 3000 cellules/μl. La sensibilité diagnostique de la détection des leucocytes par la méthode de « chimie sèche » dans le liquide péritonéal est de 88 %, la spécificité est de 94 %.

Le nombre de leucocytes dans le liquide d'ascite, le pH et la concentration de lactate dans le liquide d'ascite infecté diffèrent considérablement des valeurs de ces indicateurs dans l'ascite stérile, cependant, toutes ces valeurs changent à peu près de la même manière et il n'est pas possible de distinguer entre ascite tumorale et péritonite infectieuse.

Une teneur relative en granulocytes neutrophiles supérieure à 25 % de la population leucocytaire du liquide ascitique est considérée comme pathologique et caractéristique de la péritonite bactérienne. Chez les patients atteints de cirrhose du foie, le nombre de leucocytes dans le liquide ascitique est inversement proportionnel au volume de liquide. Le nombre de leucocytes dans le liquide d'ascite augmente avec une diminution du volume de l'ascite suite au traitement par diurétiques, tandis que la teneur relative en neutrophiles dans la formule leucocytaire ne change pas.

Si le nombre de globules blancs est supérieur à 500/µl, en particulier si le nombre de granulocytes est supérieur à 250/µl, le risque de péritonite bactérienne primaire est élevé. DANS dans ce cas La spécificité diagnostique de confirmation de ce diagnostic est de 93 %, la sensibilité est de 84 %. Dans le cancer du pancréas et le cancer hépatocellulaire, une leucocytose modérée se produit - 300-1000/μl. Dans la cirrhose alcoolique, le nombre de leucocytes dans le liquide ascitique augmente jusqu'à 1 100-21 000/µl.

La lymphocytose dans le liquide ascitique est le signe d'une exsudation congestive prolongée, d'une inflammation chronique, d'une tuberculose ou d'un processus tumoral. Chez les patients atteints de cirrhose du foie et de liquide ascitique chyleux, la teneur relative en lymphocytes varie de 12 à 96 %, avec une moyenne de 70 %.

Marqueurs tumoraux
Antigène glucidique 19-9
Dans le liquide d'ascite à une valeur seuil (niveau discriminant) de 30 U/ml, la sensibilité diagnostique d'une tumeur maligne est de 52 %, la spécificité diagnostique est de 100 %.

Antigène carcinoembryonnaire
L'étude de l'antigène carcinoembryonnaire dans le liquide d'ascite permet de différencier les maladies bénignes et malignes avec une spécificité diagnostique et une sensibilité de 83 %. À une valeur seuil de l'antigène carcinoembryonnaire de 2,5 µg/ml, la sensibilité diagnostique est de 45 %, la spécificité diagnostique est de 100 %. Si la détermination de l'antigène carcinoembryonnaire dans le liquide d'ascite est combinée à la recherche de cellules tumorales, la sensibilité diagnostique en cas de tumeur maligne augmente jusqu'à 80 %. Il est à noter que l'étude de l'antigène carcinoembryonnaire dans le liquide d'ascite a peu d'importance pour le diagnostic du mésothéliome malin diffus : l'antigène carcinoembryonnaire n'est détecté que dans 1 à 9 % des cas de cette pathologie. Parallèlement, l'antigène carcinoembryonnaire est détecté dans 80 % des cas d'ascite associée à des lésions tumorales dans les cancers de l'estomac, du sein et du poumon.

RECHERCHE CYTOLOGIQUE
La sensibilité analytique la plus élevée est obtenue par un examen cytologique des préparations colorées selon Pappenheim et Leishman et, si nécessaire, par un examen cytochimique supplémentaire. La sensibilité diagnostique de la détection des cellules tumorales au microscope optique est de 40 à 70 %. S'il est possible d'obtenir des cellules à partir de 200 ml ou plus de liquide d'ascite, la sensibilité diagnostique augmente jusqu'à 70-90 % avec une spécificité diagnostique proche de 100 %. Parfois, la détection en laboratoire des cellules tumorales dans le liquide ascitique précède la manifestation clinique de la tumeur de 3 ans ou plus.

Chez la femme, les cellules tumorales du liquide d'ascite sont, par ordre décroissant, plus souvent retrouvées dans les tumeurs des voies génitales, notamment des ovaires, puis dans les cancers du sein et du tractus gastro-intestinal. Chez l'homme, la dissémination le long du péritoine est le plus souvent déterminée dans les tumeurs du tractus gastro-intestinal et la leucémie. Dans environ 80 % des cas, la tumeur est un adénocarcinome. Parmi les processus pathologiques caractéristiques des lésions du péritoine et ne se produisant pratiquement pas dans la plèvre et le péricarde, il convient de noter le pseudomyxome péritonéal.

L'atteinte péritonéale est observée avec une tumeur productrice de mucus, le plus souvent une tumeur mucineuse limite de l'ovaire ou une mucocèle de l'appendice, ainsi qu'avec un adénocarcinome mucineux bien différencié de l'ovaire ou de l'appendice. On pense que la lésion peut se développer lors de la rupture d'une tumeur kystique et d'une dissémination généralisée des cellules tumorales dans toute la cavité abdominale. Dans le même temps, une grande quantité de mucus s'accumule dans la cavité abdominale, difficile à aspirer en raison de sa haute densité. Les frottis d'aspiration du pseudomyxome péritonéal contiennent de grandes quantités de mucus positif résistant à l'hyaluronidase. Les cellules tumorales sont généralement peu nombreuses ou inexistantes dans plusieurs échantillons. Pour poser un diagnostic, il est donc souvent nécessaire d'examiner plusieurs frottis ou d'effectuer une nouvelle ponction.

Pour établir le caractère bénin ou malin de la lésion, il faut être très prudent. Avec une lésion bénigne, les cellules sont de petite taille, avec de petits noyaux sombres, un cytoplasme moyennement abondant et le cytoplasme contient des vacuoles. Le mucus contient souvent des brins de fibrocytes. Un processus malin ne peut pas être conclu uniquement sur la base de la détection d'une grande quantité de mucus, car il peut être le résultat d'une rupture de mucocèle appendiculaire ou d'un cystadénome mucineux bénin de l'ovaire. Une prudence particulière doit être exercée dans les cas où le mucus d'une tumeur bénigne est associé à des groupes de cellules mésothéliales présentant des modifications réactives. Pour établir la nature de la lésion, les cellules productrices de mucus doivent être soigneusement examinées pour détecter la présence ou l'absence de signes de malignité.