Peritoneálna tekutina. Dôvody objavenia sa voľnej tekutiny v priestore Douglas (retrouterín)

Douglasov alebo retrouterinný priestor je anatomický priestor nachádzajúci sa v zadnej časti panvaženy. Nachádza sa medzi zadnou stenou maternice, krčka maternice, zadným vaginálnym fornixom a prednou stenou konečníka. Z fyziologického hľadiska je Douglasov vak voľný, čo znamená, že neobsahuje tekutinu ani tkanivo.

Prítomnosť stôp tekutiny v retrouterinnom priestore môže naznačovať ovuláciu a v tomto prípade nie je dôvod na obavy. Počas transvaginálneho ultrazvuku je možné zobraziť väčší objem tekutiny. Vždy je potrebné určiť charakter zistenej sekrécie - krvavá tekutina, peritoneálna tekutina (ascites), hnis a pod. Za týmto účelom sa často vykonáva diagnostická punkcia retrouterinného priestoru, aby sa získal materiál na výskum a určila sa pravdepodobná príčina akumulácie tekutín.

Príčiny prítomnosti tekutiny v Douglasovom vačku sú zvyčajne ochorenia pohlavných orgánov, ale nie vždy. Ak sa v určitých dňoch objaví tekutina v retrouterinnom priestore menštruačný cyklus, nie je dôvod na obavy.

Sexuálne zrelé ženy a dievčatá majú pravidelne – najmä bezprostredne po ovulácii (tesne po polovici cyklu) – malé množstvo voľnej tekutiny. Ak sa však zistí prítomnosť kvapaliny v prvej fáze cyklu alebo na konci druhej, a v veľké množstvá, potom môžete mať podozrenie na patológiu maternicových príveskov alebo brušná dutina.

Tekutina v retrouterinnom priestore spôsobuje

Najviac bežné dôvody vzhľad tekutiny za maternicou sú choroby:

• prasknutie ovariálnej cysty;
• vodnateľnosť vaječníkov;
• endometrióza;
• prasknutie mimomaternicového tehotenstva;
• adnexitída;
• Rakovina vaječníkov;
• zápal pobrušnice;
• enteritída;
• cirhóza pečene;
• hyperstimulácia vaječníkov (po hormonálnej stimulácii).

V závislosti od povahy tekutiny za maternicou:

Prítomnosť krvavej tekutiny za maternicou môže byť výsledkom:

• krvácanie do brušnej dutiny z panvových orgánov,
• prasknutie mimomaternicového tehotenstva,
• prasknutie ovariálnych cýst,
• prítomnosť ložísk peritoneálnej endometriózy.

Veľké množstvo ascitu (peritoneálnej) tekutiny môže byť spôsobené:

• rakovina ženských pohlavných orgánov (vaječníkov, vajcovodov, krčka maternice),
• cirhóza pečene,
• obehové zlyhanie.

Prítomnosť purulentnej tekutiny môže naznačovať:

• zápal panvy (napríklad prílohy);
• alebo brušnej dutiny (napr. peritonitída, zápalové ochorenie čriev).

Choroby, pri ktorých je v priestore Douglasa voľná tekutina

Prasknutie ovariálnej cysty

Ovariálna cysta je abnormálny priestor vo vnútri vaječníka, obklopený stenou. Existuje niekoľko typov ovariálnych cýst: jednoduché, naplnené seróznou tekutinou, dermoidné cysty a endometriálne cysty (čokoládové cysty, ktoré sa tvoria počas procesu endometriózy). Niekedy sa môže v mieste neprasknutého folikulu počas ovulácie vytvoriť cysta – tento typ cysty má tendenciu sa spontánne vstrebať. Žiaľ, môže sa stať aj to, že cysta vo vaječníku indikuje prítomnosť rakoviny. Cysty niekedy nemusia spôsobovať žiadne príznaky a sú objavené náhodne počas rutinného ultrazvuku brucha. Niekedy však ich prítomnosť môže spôsobiť rôzne ochorenia:

• menštruačné nepravidelnosti,
• nepravidelné krvácanie nesúvisiace s mesačný cyklus,
• bolesť brucha,
• bolesť v oblasti vaječníkov, kde sa nachádza cysta.

Stáva sa, že cysta praskne, vtedy žena cíti silná bolesť a počas ultrazvuku brucha zistia prítomnosť tekutiny v retrouterinnom priestore. Liečba cýst, ak nedávajú žiadne príznaky, môže pozostávať iba z ich systematického pozorovania. Ak však cysty spôsobujú problémy alebo sa zväčšujú, vyžadujú ich odstránenie (buď laparoskopicky alebo tradičnou metódou v závislosti od typu cysty).

Roztrhnutie mimomaternicového (ektopického) tehotenstva

Kedy nastáva mimomaternicové tehotenstvo? K mimomaternicovému tehotenstvu dochádza, keď sa oplodnené vajíčka uhniezdia na inom mieste, ako je telo maternice. Výskyt mimomaternicového tehotenstva sa odhaduje na približne 1 % všetkých tehotenstiev. Najčastejším miestom mimomaternicového tehotenstva je vajíčkovod. V skutočnosti sa embryo môže implantovať takmer kdekoľvek: do krčka maternice, vaječníkov alebo brušnej dutiny. Najnebezpečnejšie pre zdravie a život ženy je brušné alebo krčné tehotenstvo, ale našťastie sa vyskytujú veľmi zriedkavo.

Aké sú príznaky mimomaternicového tehotenstva? Počas mimomaternicového tehotenstva môže byť abnormálny výtok a krvácanie, okrem toho sú bolesti brucha a niekedy aj ťažkosti s vyprázdňovaním. V situácii, keď mimomaternicové tehotenstvo praskne, sa objaví akútna bolesť brucha, zatiaľ čo ultrazvukové vyšetrenie odhalí tekutinu v Douglasovom vačku. Liečba mimomaternicového tehotenstva je vždy chirurgická.

Zápal príloh

Adnexitída je charakterizovaná takzvanou vzostupnou cestou - vaginálne mikróby vstupujú do vyšších orgánov ženského reprodukčného systému. Donedávna bol najčastejším patogénom spôsobujúcim zápal príveskov gonokok. V súčasnosti pre výrazný pokles výskytu kvapavky už baktéria nie je najbežnejším organizmom. Etiologické faktory adnexitídy zahŕňajú aj nasledujúce patogény:

• chlamýdie;
• mycoplasma genitalis a iné mykoplazmy;
• coli;
• streptokoky skupiny B a iné streptokoky;
• Gardnerella gardnerella vaginalis.

Najväčší podiel na vzniku infekcie vedúcej k zápalu príveskov majú chlamýdie a gonokoky.

Aké príznaky spôsobuje adnexitída? V prvom rade môže byť bolesť v dolnej časti brucha, zvyčajne je bolesť obojstranná. Okrem toho môže byť prítomná dyspareunia (bolesť pri pohlavnom styku), ako aj abnormálny výtok z pohlavného traktu spojený so zápalom krčka maternice alebo vagíny. Objavuje sa abnormálne krvácanie – intermenštruačné krvácanie alebo veľmi silné menštruačné krvácanie a horúčka nad 38 C. Ultrazvukové vyšetrenie môže odhaliť prítomnosť tekutiny za maternicou. Liečba zápalu príloh pozostáva z použitia antibiotík a symptomatickej terapie.

Rakovina vaječníkov

Táto rakovina dlhodobo nespôsobuje žiadne príznaky, prítomnosť symptómov ako bolesť v podbrušku, zväčšenie brucha či pošvové krvácanie, žiaľ, naznačujú závažnosť rakoviny.

Peritonitída

Prítomnosť purulentnej tekutiny v retrouterinnom priestore môže naznačovať prítomnosť peritonitídy a vyžaduje si objasnenie diagnózy a vyšetrenia gastrointestinálny trakt a močových ciest.

Príznaky tekutiny v Douglasovom priestore

Príznaky závisia od príčiny akumulácie tekutiny. Napríklad v prípade prasknutia ovariálnej cysty sa môže objaviť bolesť v brušnej dutine, ktorá sa periodicky stáva ostrou a rezavou, nevoľnosť a vracanie, hnačka a strata chuti do jedla. Ak mimomaternicové tehotenstvo praskne, môžete pociťovať špinenie a krvácanie z pošvy, bolesť v podbrušku, bolesť vo vaječníkoch a niekedy aj pocit neúplného vyprázdňovania.

Keď sa prívesky zapália, objaví sa náhla kŕčovitá bolesť na oboch stranách brucha, ktorá sa zintenzívňuje počas pohlavného styku. Niekedy vyžaruje do oblasti slabín a stehien. Sprevádzaná slabosťou, horúčkou alebo horúčkovitým stavom.

Diagnostická punkcia cez zadný vaginálny fornix

Punkcia retrouterinného priestoru je jednoduchá invazívna metóda, ktorá je užitočná najmä na diagnostiku krvácania v brušnej dutine panvových orgánov a na zistenie narušeného mimomaternicového tehotenstva. Zákrok sa vykonáva v celkovej anestézii v nemocničnom prostredí. Prepichnutie Douglasovho vačku sa vykonáva cez vagínu pomocou 20 ml injekčnej striekačky a ihly s dĺžkou min. 20 cm a priemer 1,5 mm. Po zavedení zrkadla gynekológ vpichne ihlu cez zadný vaginálny fornix a následne odsaje jeho obsah do injekčnej striekačky.

Niekedy sa punkcia vykonáva pod vedením ultrazvuku, aby sa predišlo riziku prepichnutia veľkých panvových ciev. Po odstránení ihly sa obsah injekčnej striekačky dôkladne skontroluje. Získaný materiál je možné odovzdať aj na cytologické alebo bakteriologické vyšetrenie. Detekcia fragmentov zrazeniny alebo krvavej tekutiny môže naznačovať krvácanie do brušnej dutiny v dôsledku narušeného mimomaternicového tehotenstva. Tento stav s prítomnosťou klinických, laboratórnych a ultrazvukových príznakov je indikáciou na operáciu na odstránenie narušeného mimomaternicového tehotenstva, najčastejšie laparoskopickou metódou.

Nedostatok obsahu získaného počas punkcie retrouterinného vybrania nevylučuje krvácanie do peritoneálnej dutiny alebo existenciu mimomaternicového tehotenstva, najmä ak symptómy naznačujú podráždenie peritonea. Krvácanie môže byť minimálne alebo sa môžu vyskytnúť pozápalové zrasty, ktoré bránia odberu materiálu na vyšetrenie. Prítomnosť krvavej tekutiny môže tiež naznačovať endometriózu. Krvavý obsah Douglasovej dutiny sa môže infikovať (superinfekcia), čím sa zhorší stav pacientky trpiacej endometriózou. Liečba zahŕňa aspiráciu hemolyzovanej krvi z Douglasovho vačku a laparoskopické odstránenie endometriózy.

Cytologické vyšetrenie tekutiny

Detekcia zvýšeného množstva peritoneálnej tekutiny môže byť dostatočným dôvodom na udržanie onkologickej aktivity. Tekutina ascitu odobratá počas punkcie retrouterinnej dutiny by sa mala poslať na cytologické vyšetrenie na potvrdenie alebo vylúčenie nádoru. Detekcia prítomnosti rakovinových buniek v brušnej tekutine poskytuje lekárovi cenné informácie, pretože môže naznačovať výskyt primárnej malignity ženských pohlavných orgánov.

U žien, ktoré v minulosti mali rakovinu a podstúpili operáciu, môže tento príznak naznačovať, že sa rakovina vrátila. Typicky je prítomnosť nádorových buniek v peritoneálnej tekutine spojená s väčším rozšírením gynekologického karcinómu, ktorý je u týchto pacientok nepriaznivým prognostickým faktorom. Je potrebné poznamenať, že cytologické vyšetrenie tekutiny z peritoneálnej dutiny je len pomocnou metódou pri identifikácii malígnych nádorov vaječníka, vajcovodu a krčka maternice.

Cytologické vyšetrenie tekutého sedimentu môže odhaliť aj zvýšený počet zápalových buniek, ktoré sa objavujú pri rôznych zápaloch panvových orgánov. Nakoniec, zvýšené množstvo peritoneálnej tekutiny je výsledkom iných chorôb, ako je cirhóza pečene alebo obehové zlyhanie.

Kedy by ste mali navštíviť lekára?

Pacienti by sa mali okamžite poradiť s lekárom, ak sa okrem zvýšenej tekutiny v dutine Douglas vyskytnú nasledujúce príznaky:

• bolesť brucha,
• bolestivý pohlavný styk
• krvácanie z genitálneho traktu nesúvisiace s menštruáciou, kontaktné krvácanie,
• nevoľnosť, vracanie,
• rýchly nárast obvodu brucha,
• horúčka, zimnica,
• strata váhy.

Liečba

Liečba závisí od príčiny tekutiny v retrouterinnom priestore. Napríklad, ak praskne cysta na vaječníku, zvyčajne je potrebný chirurgický zákrok na odstránenie cysty. Ak mimomaternicové tehotenstvo praskne, musí sa odstrániť laparoskopicky.

1

Pomocou dvojrozmernej elektroforézy a hmotnostnej spektrometrie s časom letu bol študovaný proteomický profil peritoneálnej tekutiny pri endometrióze vonkajších genitálií. Boli identifikované rozdielne proteíny, ktoré sa objavujú pri endometrióze vonkajších pohlavných orgánov: apolipoproteín A-IV, globulín viažuci pohlavné hormóny, zložky komplementového systému C3 a C4b. Medzi proteíny neprítomné pri endometrióze vonkajších pohlavných orgánov patrí diferenciačný faktor pigmentového epitelu, transtyretín, haptoglobín, α-1-antitrypsín a inhibítor apoptózy 6. Diskutuje sa možný význam identifikovaných proteínov vo vývoji hlavných porúch endometriózy. Objavené rozdielne proteíny môžu byť použité ako markery tohto ochorenia.

endometrióza vonkajších genitálií

peritoneálna tekutina

proteomická analýza

veveričie rozdiely

1. Adamyan, L.V. Endometrióza: príručka pre lekárov / L.V. Adamyan, V.I. Kulakov, E.N. Andreeva // M.: Medicína, 2006. – 416 s.

2. Govorun, V.M. Proteomické technológie v modernej biomedicínskej vede / V.M. Govorun, A.I. Archakov // Biochémia. – 2002.– Číslo 10.– S.1341–1359.

3. Dedko, M.I. Systém proteolýzy v krvnom sére a peritoneálnej tekutine počas chirurgickej liečby pacientok s endometriózou / M.I. Dedko, L.E. Radetskaya, L.N. Kirpichenok // Správy o chirurgii. – 2006. – č. 3. – S.74-80.

4. Ishchenko, A.I. Endometrióza: diagnostika a liečba / A.I. Ishchenko, E.A. Kudrina // M.: GEOTAR-MED, 2002. – 104 s.

5. Linde, V.A. Proteomické technológie pri štúdiu endometriózy / V.A. Linde, L.R. Tomai, V.O. Gunko a kol. // Med. Vestn. Juh Ruska. – 2013. – č. 4. – S.12-16.

6. Minkevič, N.I. PEDF-neinhibičný serpín s neuroprotektívnymi a antiangiogénnymi aktivitami / N.I. Minkevič, V.M. Lipkin, I.A. Kostanyan // ActaNaturae. – 2010. – Číslo 3. – S.74-84.

7. Bedaiwy, M.A. Prostredie peritoneálnej tekutiny pri endometrióze. Klinickopatologické dôsledky / M.A. Bedaiwy, T. Falcone // Minerva Ginecol. –2003. – V.55, N 4. – S.333-345.

8. Bernard, K.R. Metódy vo funkčnej proteomike: dvojrozmerná elektroforéza na polyakrylamidovom géli s imobilizovanými gradientmi pH, štiepenie v géli a identifikácia proteínov hmotnostnou spektrometriou / K.R. Bernard, K.R. Jonscher, K.A. Resing, N.G.Ahn //Methods Mol. Biol. – 2004. –V. 250.– S. 263-282.

9. Hammond, G.L. Rôzne úlohy globulínu viažuceho pohlavné hormóny v reprodukcii / G.L. Hammond // Biol. Reprod. – 2011. – V. 85, N 3. – S.431-441.

10. Kabut, J. Hladiny komponentov komplementu iC3b, C3c, C4 a SC5b-9 v peritoneálnej tekutine a sére neplodných žien s endometriózou / J. Kabut, Z. Kondera-Anasz, J. Sikora et al. // Fertil. Sterilné. –2007. – V.88, N 5. – S.1298-1303.

11. Richardson S.J. Bunková a molekulárna biológia transtyretínu a hormónov štítnej žľazy / S.J. Richardson // Int. Rev. Cytol. – 2007. – V. 258. – S.137-193.

12. Sarrias M.R. Úloha ľudského Sp alfa ako receptora na rozpoznávanie vzorov / M.R. Sarrias, S. Roselló, F. Sánchez-Barbero a kol. // J. Biol. Chem. – 2005. – V. 280, N 42. – S. 35391-35398.

13. Spaulding H.L. Apo A-IV: aktualizácia o regulácii a fyziologických funkciách / H.L. Spaulding, E. Delvin, M. Lambert a kol. //Biochim. Biophys. Acta. – 2003. – V.1631, N 2. – S.177-187.

14. Wassell J. Haptoglobin: funkcia a polymorfizmus / J. Wassell // Clin. Lab. –2000. – V. 46, N 11-12. – S.547-552.

Význam štúdia vonkajšej genitálnej endometriózy (EGE) je spojený s vysokým výskytom tejto patológie u žien vo fertilnom veku a jej významným vplyvom na ich reprodukčné zdravie a životnú úroveň. V súčasnosti sa preukázala dôležitá úloha peritoneálnej tekutiny (PF) v patogenéze endometriózy, pretože práve v ňom dochádza k rozvoju a rastu endometrioidných ložísk. Štúdium proteínového zloženia pankreasu pomocou proteomických technológií zameraných na štúdium súhrnu proteínov exprimovaných genómom vytvára kvalitatívne nové možnosti na prehĺbenie pochopenia molekulárnych mechanizmov rozvoja endometriózy, jej predikcie a skorá diagnóza.

Cieľ práce. Študovať proteomické spektrum pankreasu žien s a bez NGE.

Materiál a metódy výskumu

Štúdia zahŕňala 20 pacientov v reprodukčnom veku ( priemerný vek 29,3±0,3 roka), z toho 10 pacientok s NGE so štádiami III-IV ochorenia podľa r-AFS klasifikácie (hlavná skupina) a 10 bez endometriózy (kontrolná skupina). Študijným materiálom bol pankreas získaný z retrouterinného priestoru počas laparoskopie. Proteomická analýza pankreasu sa uskutočnila pomocou dvojrozmernej elektroforézy v polyakrylamidovom géli (zariadenia Protein IEFCell a ProteanIIxiMulti-Cell, Bio-Rad, USA) s následným farbením proteínov iónmi striebra. Identifikácia proteínov po ich trypsinolýze sa uskutočňovala hmotnostnou spektrometriou MALDI time-of-flight na hmotnostnom spektrometri AutoflexII (Bruker, Nemecko) pomocou programu MascotMSSearch (MatrixScience, USA) a databáz NCBI a Swiss-Prot Výsledky proteínov identifikácia bola akceptovaná ako spoľahlivá na hladine významnosti aspoň 95 % a pokrytie sekvencií aspoň 60 %.

Významnosť rozdielov v proteomickom spektre pankreasu žien v kontrolnej a hlavnej skupine bola stanovená pomocou c2 testu (program Statistica verzia 6.0, StatSoft. Jnc.). Výsledky boli vyhodnotené ako štatisticky významné u p<0,05.

Výsledky výskumu a diskusia

Ako výsledok proteomickej analýzy pankreasu sa identifikovalo množstvo rozdielnych proteínov, ktorých prítomnosť alebo neprítomnosť sa vyskytuje iba v NGE (pozri tabuľku, obrázok). V pankrease žien hlavnej skupiny sa teda zistil výskyt nasledujúcich proteínov: apolipoproteín A-IV, globulín viažuci pohlavné hormóny (SHBG), zložky komplementového systému C3 a C4b, ktoré neboli zistené u pacientov kontrolná skupina.

stôl 1

Identifikované pankreatické proteíny žien v kontrolnej a hlavnej skupine

	Názov proteínu
	a-1-antitrypsín
	Diferenciačný faktor pigmentového epitelu
	Doplňte komponent systému C3
	Apolipoproteín A-IV
	Haptoglobín
	Globulín viažuci pohlavné hormóny
	Inhibítor apoptózy 6
	Komponent systému doplnku C4-b
	transtyretín

Poznámka: pI - izoelektrický bod, Mm - molekulová hmotnosť, „+“ - prítomnosť proteínu, „-“ - neprítomnosť proteínu, p - spoľahlivosť rozdielov medzi skupinami.

A B

Ryža. 1. Proteomické mapy peritoneálnej tekutiny žien v kontrolnej (A) a hlavnej (B) skupine

Poznámka. Číslovanie bielkovín zodpovedá číslu v tabuľke

Zvýšenie produkcie (a v dôsledku toho aj výskyt v pankrease) apolipoproteínu A-IV, ktorý má antioxidačné a protizápalové vlastnosti, má samozrejme kompenzačnú hodnotu v podmienkach oxidačného stresu a zápalu, ktoré sprevádzajú rozvoj túto patológiu.

Zvýšená hladina SHBG pri endometrióze, ktorá reguluje biologickú dostupnosť steroidných hormónov pre endometriálne bunky, vytvára podmienky pre lokálny hyperestrogenizmus. Za týchto podmienok je možné zvýšiť proliferatívny potenciál endometrioidných heterotopických buniek.

Zvýšená sekrécia komponentov komplementového systému C3 a C4b peritoneálnymi makrofágmi, ktoré sa podieľajú na zápalovej odpovedi, neutralizácii apoptotických buniek a imunitných komplexov, určitým spôsobom prispieva k mechanizmom rozvoja endometriózy a neplodnosti spojenej s endometriózou.

Spolu s týmito odchýlkami v NGE chýba v proteomickom spektre pankreasu 5 proteínov: pigmentový epiteliálny diferenciačný faktor, transtyretín, inhibítor apoptózy 6, haptoglobín a α-1-antitrypsín.

Pigmentový epiteliálny diferenciačný faktor je jedným z najsilnejších antiangiogénnych a antiproliferatívnych faktorov, takže inhibícia jeho expresie môže byť jedným z dôvodov vedúcich k zníženiu apoptózy endometria a zvýšenej angiogenéze, čo podporuje implantáciu a rast heterotopií.

Absencia hlavnej skupiny transtyretínu, ktorý transportuje T3 a T4, v pankrease žien zrejme vytvára lokálny nadbytok hormónov štítnej žľazy, ktorých toxický účinok vedie k poškodeniu reprodukčných orgánov. Hormóny štítnej žľazy, modulujúce účinky estrogénov na bunkovej úrovni, môžu prispievať k rozvoju porúch histo- a organogenézy hormonálne citlivých štruktúr a k zhoršeniu endometriózy.

Medzi proteínmi, ktoré nie sú identifikované v NGE, hrá inhibítor apoptózy vylučovaný makrofágmi dôležitú úlohu pri regulácii imunitnej odpovede6. Možno práve narušenie expresie tohto proteínu vedie k vzniku nerovnováhy imunokompetentných buniek v pankrease (v dôsledku potlačenia apoptózy T lymfocytov a NK buniek).

Neprítomnosť neenzymatického antioxidantu haptoglobínu v pankrease môže prispievať k zvýšenému oxidačnému stresu, ktorý vzniká pri endometrióze.

Pri tejto patológii sa v pankrease nezistil ani α-1-antitrypsín, inhibítor serínových proteáz, ktoré sa priamo podieľajú na procesoch invázie endometriálnych buniek, čo zjavne spôsobuje nerovnováhu v systéme inhibítorov proteázy, čo podporuje implantáciu endometriálnych buniek.

Vykonané štúdie naznačujú, že vývoj endometriózy sa vyskytuje na pozadí zmien v produkcii mnohých dôležitých proteínov, ktoré sa podieľajú na regulácii hormonálneho účinku, angiogenéze, apoptóze, redoxných procesoch, zápale a imunitnej odpovedi.

závery

1. Modifikácia proteomického spektra pankreasu je dôležitým patogenetickým faktorom pri vzniku NGE.

2. Proteíny, ktoré chýbajú alebo sa objavujú v pankrease počas endometriózy, môžu slúžiť ako informatívne markery tohto ochorenia.

Recenzenti:

Avrutskaya V.V., doktor lekárskych vied, vedúci výskumný pracovník oddelenia pôrodníctva a gynekológie, vedúci ambulantného oddelenia Federálnej štátnej rozpočtovej inštitúcie „RNIIAP“ Ministerstva zdravotníctva Ruska. Federálna štátna rozpočtová inštitúcia „Rostovský výskumný ústav pôrodníctva a pediatrie“ Ministerstva zdravotníctva Ruska, Rostov na Done;

Kaushanskaya L.V., doktor lekárskych vied, hlavný výskumník oddelenia pôrodníctva a gynekológie Federálnej štátnej rozpočtovej inštitúcie „RNIIAP“ Ministerstva zdravotníctva Ruska. Federálna štátna rozpočtová inštitúcia „Rostovský výskumný ústav pôrodníctva a pediatrie“ Ministerstva zdravotníctva Ruska, Rostov na Done.

Bibliografický odkaz

Tomai L.R., Linde V.A., Ermolova N.V., Gunko V.O., Pogorelova T.N. ÚLOHA PROTEKÁLNEJ NEROVNOVÁHY PERITONEÁLNEJ TEKUTINY V PATOGENÉZE VONKAJŠEJ GENITÁLNEJ ENDOMETRIÓZY // Moderné problémy vedy a vzdelávania. – 2014. – č. 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=17171 (dátum prístupu: 02/01/2020). Dávame do pozornosti časopisy vydávané vydavateľstvom „Akadémia prírodných vied“

Peritoneálna tekutina je látka zodpovedná za hydratáciu brušnej steny a orgánov v brušnej dutine.

Pomáha predchádzať treniu medzi orgánmi v panvovej dutine, keď sa pohybujú počas trávenia potravy.

Táto tekutina pozostáva z vody, elektrolytov, protilátok, bielych krviniek a biochemikálií.

Peritoneálna tekutina dostala svoj názov podľa latinského názvu pre peritoneum (peritoneum), čo je serózna membrána pokrývajúca vnútorné orgány a steny brušnej dutiny. Serózna membrána je membrána, ktorá produkuje tekutinu.

Vrstvy pobrušnice

Pobrušnica, ktorá produkuje peritoneálnu tekutinu, pozostáva z dvoch vrstiev. Prvou vrstvou je parietálna pobrušnica, ktorá sa pripája k stene brušnej dutiny. Je zdrojom tekutiny, ktorá zvlhčuje steny brušnej dutiny. Druhou vrstvou je viscerálna pobrušnica, ktorá obaľuje vnútorné orgány nachádzajúce sa v panvovej dutine. Vo viscerálnom pobrušnici sa tvorí peritoneálna tekutina, ktorá chráni brušné orgány.

Niektoré brušné orgány, ktoré sú lubrikované peritoneálnou tekutinou, zahŕňajú pečeň, slezinu, žlčník, obličky, pankreas a žalúdok. Bez tejto tekutiny môže ich pohyb spôsobiť podráždenie v príslušnej oblasti tela. To môže viesť k infekcii.

Hoci je peritoneálna tekutina mimoriadne dôležitá, nadbytočná tekutina môže mať vážne následky.

Nadmerná tvorba tejto tekutiny môže byť spôsobená ochorením pečene, srdcovým zlyhaním a rakovinou vaječníkov, prsníka, hrubého čreva, pľúc, žalúdka a pankreasu. Termín ascites sa používa na označenie prítomnosti prebytočnej tekutiny v brušnej dutine.

Príznaky prebytočnej peritoneálnej tekutiny

Vzhľadom na závažnosť ochorení spojených s nadbytkom peritoneálnej tekutiny je veľmi dôležité rozpoznať symptómy tohto stavu. Niektoré z bežných príznakov zahŕňajú nadúvanie, ťažkosti s dýchaním, pocit ťažkosti alebo plnosti, opuchnuté nohy a krv vo zvratkoch. Pre tých, ktorí môžu mať rakovinu, príznaky zahŕňajú aj výrazný úbytok hmotnosti a únavu.

Prvým krokom pri diagnostikovaní prítomnosti nadbytočnej peritoneálnej tekutiny je zvyčajne fyzikálne vyšetrenie lekárom. V prípade podozrenia na tento stav je možné objednať ultrazvuk alebo počítačovú tomografiu. Niektoré invazívnejšie postupy na potvrdenie prítomnosti nadbytočnej peritoneálnej tekutiny zahŕňajú biopsiu pečene alebo odstránenie časti tekutiny na testovanie.

Liečba prebytočnej peritoneálnej tekutiny

Liečba nadmerného objemu peritoneálnej tekutiny môže zahŕňať diuretiká na zníženie tlaku, ktorý vyvíja. Pacienti s týmto stavom musia tiež znížiť príjem soli, čo zvyčajne pomáha zvládať zadržiavanie tekutín v tele. V niektorých prípadoch sa určité množstvo peritoneálnej tekutiny odstráni pomocou injekčnej striekačky alebo skratu. Ak je prítomná infekcia, môžu byť potrebné antibiotiká.

UDC 579 842,23+ 616-092,19

T.P. Starovoitová, T.A. Ivanová, G.B. Mukhturgin, S.A. Vityazeva, V.I. Dubrovina,

K.M. Korytov, S.V. Balakhonov

ZMENY V BUNKOVOM ZLOŽENÍ PERITONEÁLNEJ TEKUTINY BIELECH MYŠI POČAS INFEKČNÉHO PROCESU SPÔSOBENÉHO YERSINIA PESTIS S RÔZNYM ZLOŽENÍM PLAZMIDU

Irkutský výskumný protimorový inštitút na Sibíri a Ďalekom východe (Irkutsk)

Článok prezentuje údaje o vplyve plazmidového zloženia mikróbov moru na subpopulačné zloženie mononukleárnych buniek v peritoneálnej tekutine bielych myší v skorých štádiách infekčného procesu. Ukázalo sa, že zmeny v bunkovom zložení peritoneálnej tekutiny experimentálnych zvierat závisia od plazmidového profilu kmeňov morových mikróbov. Experiment tiež odhalil fázový vzor v zmenách v kvantitatívnom zložení žírnych buniek v peritoneálnej tekutine bielych myší infikovaných kmeňmi Yersinia pestis s rôznymi plazmidovými spektrami. Kľúčové slová: Yersinia pestis, peritoneálna tekutina, virulencia

ZMENY V BUNKOVÝCH KOMPONENTÁCH PERITONEÁLNEJ TEKUTINY BIELYCH MYŠÍ S INFEKCIOU SPÔSOBENOU YERSINIA PESTIS S RÔZNYM PLAZMIDOVÝM PROFILOM

T.P. Starovoytova, T.A. Ivanová, G.B. Mukhturgin, S.A. Vityazeva, V.I. Dubrovina,

K.M. Korytov, S.V. Balakhonov

Irkutský výskumný ústav boja proti moru na Sibíri a Ďalekom východe, Irkutsk

Článok prezentuje údaje o vplyve profilu plazmidov Yersinia pestis na subpopulačnú štruktúru mononukleárnych buniek peritoneálnej tekutiny myší v skorých štádiách infekčného procesu. Ukázalo sa, že zmena bunkového zloženia peritoneálnej tekutiny experimentálnych zvierat závisela od plazmidového profilu kmeňov Yersinia pestis. Bol stanovený fázový charakter v zmenách kvantitatívneho zloženia žírnych buniek peritoneálnej tekutiny bielych myší infikovaných kmeňmi Y. pestis s rôznym plazmidovým spektrom. Kľúčové slová: Yersinia pestis, peritoneálna tekutina, virulencia

Prevažná väčšina faktorov virulencie Yersinia pestis súvisí s plazmidom. Genóm pôvodcu moru hlavného poddruhu - Yersinia pestis subspecies pestis - má tri plazmidy - pYU(45MDa), pYP(6MNa) a pYT(61MDa), ich úloha je dobre študovaná pri implementácii patogénnych vlastností Yersinia . V prítomnosti plazmidu pYV vykazujú kmene Yersinia mnoho fenotypových charakteristík: bunkovú adhéziu, autoaglutináciu, povrchovú aglutináciu, ako aj syntézu vonkajších membránových proteínov, vrátane V- a W-antigénov a iných proteínov, ktorých pôsobenie je zamerané pri potláčaní fagocytárnej aktivity systémov imunitných buniek. Plazmidy pYP a pYT sú druhovo špecifické. Plazmid pYP určuje syntézu bakteriocínu pesticínu 1 a aktivátora plazminogénu a plazmid pYT kóduje dva najviac preštudované faktory virulencie - myšací toxín a kapsuly F1. Charakteristickým znakom patogénu cirkulujúceho v ohnisku Tuva je prítomnosť ďalšieho štvrtého plazmidu pTRZZ v jeho genóme s doposiaľ nejasnými funkciami. Predpokladá sa, že tento plazmid je geneticky modifikovaná verzia 9,5 kD rezidentného plazmidu nesúceho gény pla (aktivátor plazminogénu) a pstl (pesticín 1). Strata plazmidu vedie k zmenám biochemických a kultúrnych vlastností, ako aj k zníženiu alebo úplnej strate virulencie patogénu.

Vedúci klinický príznak morovej infekcie a intoxikácie, ktorý určuje závažnosť priebehu

a výsledkom choroby je porušenie homeostázy makroorganizmu. Primárnymi cieľmi pre endotoxín sú polymorfonukleárne leukocyty, makrofágy, monocyty, endotelové bunky a iné bunkové elementy. Zmeny v bunkovom zložení peritoneálnej tekutiny možno považovať za diagnostické kritérium závažnosti ochorenia pri mnohých ochoreniach, vrátane moru. V tomto ohľade je veľmi zaujímavé hodnotenie kvantitatívneho a kvalitatívneho bunkového zloženia peritoneálnej tekutiny u bielych myší počas infekčného procesu spôsobeného Y. pestis s rôznym zložením plazmidov.

Cieľ práce: študovať dynamiku zmien v subpopulačnom zložení mononukleárnych buniek v peritoneálnej tekutine bielych myší v počiatočných štádiách experimentálnej morovej infekcie.

MATERIÁLY A METÓDY

Experimentálnym modelom v experimentoch bolo 175 outbredných, ale štandardných v podmienkach zadržania a hmotnosti (18-20 g) bielych myší oboch pohlaví. Zvieratá boli z pokusu vyradené v súlade s „Pravidlami laboratórnej praxe v Ruskej federácii“, schválenými vyhláškou Ministerstva zdravotníctva Ruskej federácie č. 267 z 19. júna 2003 a národným štandardom Ruskej federácie. GOST R 53434-2009 „Zásady správnej laboratórnej praxe“.

Použili sme 6 kmeňov Y. pestis subsp. pestis a Y. pestis subsp. altaja zo zbierky Múzea Ir-

stôl 1

Charakteristika testovaných kmeňov mikróbov moru

Kmeň Miesto izolácie Zloženie plazmidu Virulencia pre biele myši ^Obo), m.c.

Y. pestis subsp. pestis I-2638 Tuvanský prírodný mor ohnisko pYP+pYV+pTP33+pYT+ 10 / vysoko virulentný

Y. pestis subsp. pestis I-3479 Irkutsk Anti-Plague Institute pYP+pYV-pTP33+pYT+ avirulentný

Y. pestis subsp. pestis I-3480 Irkutsk Anti-Plague Institute pYP-pYV-pTP33+pYT+ avirulentný

Y. pestis subsp. altaica I-2359 Gorno-Altaj prirodzené prepuknutie moru pYP+pYV+pYT+ 4 x 104/mierne virulentný

Y. pestis subsp. altaica I-2948 Gorno-Altaj prirodzené ohnisko moru pYP-pYV+pYT+ 3 x 108/reziduálna virulencia

Y. pestis subsp. altaica I-2948/3 Irkutsk Anti-Plague Institute pYP-pYV-pYT+ avirulent

Výskumný ústav Kut proti moru Rospotrebnadzor (tabuľka 1).

Intaktné biele myši boli rozdelené do 6 experimentálnych a 1 kontrolnej skupiny po 25 jedincoch. Zvieratá v experimentálnych skupinách boli infikované Y. pestis v koncentrácii 1 x 106 mc v objeme 0,5 ml intraperitoneálnou metódou. Prvej experimentálnej skupine zvierat bola injekčne podaná dvojdňová kultúra Y. pestis subsp., pestovaná pri teplote 28 °C. pestis I-2638, skupina II - Y. pestis subsp. pestis I-3479, skupina III - Y. pestis subsp. pestis I-3480, IV pokusná skupina zvierat bola infikovaná referenčným kmeňom Gorno-Altai Y pestis subsp. altaica I-2359, skupina V - Y. pestis subsp. altaica I-2948, skupina VI - selekčný kmeň Y. pestis subsp. altaja I-2948/3.

Materiál z experimentálnych zvierat (peritoneálna tekutina) sa odoberal po 30, 60, 90, 120 a 180 minútach. Celkový počet jadrových buniek v 1 ml peritoneálnej tekutiny sa spočítal vo fixovaných preparátoch zafarbených štandardnými metódami. Na bakteriologickú analýzu sa krv zo srdca a peritoneálna tekutina (vždy 0,1 ml) naočkovali na tuhé živné médium (Hottinger agar, pH 7,2).

V tejto práci boli použité metódy prieskumnej mikroskopie. Kvantitatívne hodnotenie celkového počtu leukocytov sa uskutočnilo pomocou metódy jednotného počítania buniek v Goryaevovej komore. Percento rôznych typov leukocytov bolo stanovené morfologickým vyšetrením peritoneálnej tekutiny v náteroch. Pri štúdiu preparátov pomocou počítačového programu „MoticImagesPlus“ (verzia 2) sa vykonal diferencovaný počet tkanivových bazofilov (TB) a zmeral sa ich priemer a plocha. Stupeň aktivácie žírnych buniek bol hodnotený indexom bunkovej degranulácie (CDI) - percentuálnym pomerom degranulovaných žírnych bazofilov k ich celkovému počtu.

Automatická analýza obrazu sa uskutočnila pomocou svetelného mikroskopu Zeiss (Nemecko) s videokamerou Moticam 2000, rozlíšenie 1392 x 1040 pixelov, cca. 10, zv. 100.

Významnosť výsledkov výskumu bola získaná matematickými metódami štatistického spracovania pomocou komparatívnej analýzy pomocou Studentovho t-testu a pomocou počítačového programu Statistica, verzia 6.0 (StatSoft Inc. 19842001, IPCI 31415926535897) a softvérového balíka

Microsoft Office Excel (2003). Výsledky sa považovali za významné v porovnaní s kontrolou na p< 0,05.

VÝSLEDKY A DISKUSIA

Celkový počet buniek v peritoneálnej tekutine u intaktných zvierat je 4,3 ± 0,9 x 103 na 1 cm3, pričom makrofágy sú prevládajúcim typom buniek a predstavujú 60,5 ± 5,6 % z celkového počtu buniek a lymfocyty tvoria 17,0 ± 2,8 %; 5,5 ± 0,8 % tvoria mezoteliálne bunky a iné bunkové elementy.

U infikovaných bielych myší sa pozorujú fázové zmeny v celkovom počte buniek s jadrami. U zvierat infikovaných virulentným kmeňom Y. pestis subsp. pestis I-2638, po 30 minútach sa celkový počet jadrových buniek prudko zvýši na 1,5 ± 0,4 x 104 na 1 cm3, čo je 3,4-krát viac ako u intaktných zvierat. Do 60 minút štúdie sa ukazovatele znížia na neporušené hodnoty a v nasledujúcich obdobiach sa naďalej znižujú. Cytologický obraz peritoneálnej tekutiny má jasný vzťah s infekčnou kultúrou. U zvierat skupiny I sa 30 minút po infekcii pozoroval nárast počtu lymfocytov, prevyšujúci hodnotu u intaktných zvierat 4-krát v dôsledku prudkého poklesu počtu monocytov. Tieto zmeny boli zistené počas všetkých období pozorovania. V peritoneálnej tekutine bielych myší infikovaných Y. pestis subsp. pestis I-2638, 120 minút od začiatku experimentu bol zaznamenaný 2,5-násobný nárast počtu segmentovaných neutrofilov v porovnaní s kontrolou (p< 0,05), и незначительное увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов. На последнем сроке исследования в мазках перитонеальной жидкости выявляется большое количество фибробластов, агрегация лимфоцитов и большое количество делящихся клеток.

U bielych myší infikovaných Y. pestis subsp. altaica I-2359, Y. pestis subsp. pestis I-3479 a Y. pestis subsp. altaica I-2948/3, 30 minút po začiatku experimentu nenastali žiadne štatisticky významné zmeny. Po 180 minútach počet jadrových buniek v peritoneálnom exsudáte prevyšuje kontrolné hodnoty o 2,8 (p< 0,01), 1,9 (р < 0,05) и 1,5 раза соответственно. При введении животным Y. pestis subsp. pestis И-3480 и Y. pestis subsp. altaica И-2948 через 30 мин отмечается повышение общего числа ядерных клеток с последующим снижением (120 мин) до уровня контроля, и к 180 мин показатель вновь увеличивается.

Pri prezeraní náterov peritoneálnej tekutiny u zvierat všetkých experimentálnych skupín sa zaznamenáva bunková proliferácia lymfocytov, histiocytov, zvýšenie počtu eozinofilov, tkanivových bazofilov, plazmatických buniek, mezoteliálnych buniek a fibroblastov.

Hodnotenie morfologických vlastností bazofilov, ich počtu a funkčnej aktivity je zaujímavé pri štúdiu bunkového zloženia peritoneálnej tekutiny infikovaných zvierat.

Zistilo sa, že u experimentálnych bielych myší existuje fázový vzor zmien v kvantitatívnom zložení tkanivových bazofilov v peritoneálnej tekutine. Nárast ich počtu u zvierat infikovaných Y. pestis subsp. pestis I-2638, sa zaznamenáva 60 minút po zavedení kultúry, pričom hodnoty u intaktných zvierat prekračuje 2,6-krát (p< 0,05). Затем данные показатели снижаются (90-120 мин) до значений ин-тактных животных, к 180 мин вновь возрастают, достигая значений 8,5 против 2,5 в контроле (р < 0,05). Часть ТК представлены интестинальными - незрелыми формами (рис. 1), появление которых можно расценивать как процесс компенсации.

Ryža. 1. Biela myš infikovaná Y. pestis subsp. pestis I-2638. Peritoneálna tekutina. Črevné žírne bunky. Farbenie podľa Romanovského - Giemsa, uv. x 100.

V počiatočných štádiách štúdie tvorili atypické TC 21,0 ± 1,8 % z celkového počtu TC, v posledných fázach sa tieto čísla zvýšili na 25,2 ± 2,1 %. Atypické TC majú minimálny funkčný potenciál a sú podstatne menšie. Priemer bunky je 6,8-8,6 mikrónov, čo je v priemere 2,3-krát menej (str< 0,05), по сравнению с диаметром типичных ТК. Таких клеток значительно меньше в перитонеальной жидкости белых мышей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2359, и только в период 120-180 мин после заражения отмечаются единичные интестинальные тканевые базофилы. У животных других опытных групп атипичные ТК не выявляются.

Vo všeobecnosti aktivácia systému TC odráža všeobecnú adaptívnu reštrukturalizáciu tela v reakcii na zavedenie antigénu. K degranulácii tkanivových bazofilov dochádza pozdĺž cesty celogranulárnej exocytózy (obr. 2). Funkčná aktivita tkanivových bazofilov v peritoneálnej tekutine experimentálnych zvierat má fázový charakter. Zaznamenáva sa najvyšší IDTK

u bielych myší 60 minút po infekcii Y. pestis subsp. pestis I-2638 - 3,9 ± 0,6, čo je 18,5-násobok (p< 0,01) выше значения у интактных животных, затем показатель резко снижается, но к 180 мин исследований он вновь повышается, превышая значение в контрольной группе в 4,4 раза (р < 0,01). У селекционных клонов Y. pestis subsp. pestis И-3479 и И-3480 максимальное значение индекса дегрануляции имеет место через 90 мин от начала опыта и составляет 2,0 ± 0,3 и 1,3 ± 0,4 соответственно, при этом у белых мышей II опытной группы показатели во все сроки исследования были выше, чем у животных III опытной группы.

Ryža. 2. Biela myš infikovaná Y. pestis subsp. pestis I-2638. Peritoneálna tekutina. Žírne bunky. Degranulácia. Farbenie podľa Romanovského - Giemsa, uv. x 100.

Najvýraznejší fázový charakter zmien tkanivových bazofilov sa pozoruje u bielych myší experimentálnej skupiny IV. Maximálna hodnota IDTK sa vyskytuje v druhom a štvrtom štádiu štúdie, pričom prekračuje hodnoty intaktných zvierat 5,8 a 7,4-krát (p< 0,05) соответственно. У особей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2948/3, только на двух сроках исследования (60-90 мин) регистрируется увеличение дегрануляции тучных клеток в 3,6 и 2,6 раза соответственно (р < 0,05), в другие сроки данные статистически не значимы. У белых мышей V опытной группы максимальное значение ИДТК приходится на второй и последний срок исследования - 0,99 и 0,92 у. е., при в контроле отмечается 0,21 у. е.

ZÁVER

Vývoj infekčného procesu v prvých hodinách po inokulácii patogénu moru teda závisí od jeho plazmidového profilu, pretože najvýraznejšie zmeny v kvantitatívnom a kvalitatívnom bunkovom zložení peritoneálnej tekutiny boli zistené u pokusných zvierat pri infekcii kmeňmi obsahujúcimi pYP+pYV+pYT+.

Fázový vzor odhalený počas experimentu v zmenách kvantitatívneho zloženia žírnych buniek v peritoneálnej tekutine, najmä u jedincov infikovaných virulentným kmeňom Y. pestis subsp. pestis I-2638 (pYP+pYV+pTP33+pYT+), ako aj prítomnosť nezrelých a atypických foriem MC naznačujú vývoj kompenzačných procesov.

Vo všeobecnosti aktivácia systému žírnych buniek odráža všeobecnú adaptívnu reštrukturalizáciu tela v reakcii na zavedenie antigénu.

LITERATÚRA ODKAZY

1. Anisimov A.N. Ypestis faktory zabezpečujúce cirkuláciu a zachovanie patogénu moru v ekosystémoch prírodných ohnísk. Správa 1 // Molekulárna genetika, mikrobiol. a virusol. - 2002. - č. 3. - S. 3-23.

Anisimov A.N. Faktory Y. pestis zabezpečujúce cirkuláciu a uchovávanie infekčného agens moru v ekosystémoch prírodných ohnísk. Správa I // Molekuljarnaja genetika, microbiol. i virusol. - 2002. - N 3. - S. 3-23. (v ruštine)

2. Balakhonov S.V. Detekcia nukleotidových sekvencií génov pla, pstl a cafl na 33 kd kryptickom plazmide kmeňov Yersiniapestis z ohniska moru Tuvan // 8th Int. Symp. na Yersinia. -Turku, Fínsko, 2002. - Číslo 10. - S. 352-355.

Balakhonov S.V. Detekcia nukleotidových sekvencií génov pla, pstl a cafl v kryptickom plazmide 33 kb kmeňov Yersinia pestis z ohniska moru Tuva // 8th Int. Symp. na Yersinia. - Turku, Fínsko, 2002. - N 10. - S. 352-355. (v ruštine)

3. Vityazeva S.A., Starovoitova T.P., Bushkova A.V. Tkanivové bazofily ako zástupcovia veľkej bunkovej populácie systému APUD. - Odd. vo VINITI č. 376-B2010 17.06.2010. - 18 s.

Vityazeva S.A., Starovoytova T.P., Bushkova A.V. Tkanivové bazofily ako predstavitelia početnej bunkovej populácie systému APUD. - Odd. vo VINITI N 376-В2010 17.06.2010. - 18:00 hod. (v ruštine)

4. Krasnoženov E.P., Fedorov Yu.V. Vplyv infekčného procesu na morfofunkčné charakteristiky tkanivových bazofilov // Journal. mikrobiol., epidemiol. a imunol. - 1996. - Číslo 1. - S. 107-108.

Krasnoženov E.P., Fedorov Yu.V. Vplyv infekčného procesu na morfofunkčné charakteristiky

tkanivových bazofilov // Zhurn. mikrobiol., jepidemiol. i imunol. - 1996. - N 1. - S. 107-108. (v ruštine)

5. Lebedeva S.A., Trukhachev A.L., Ivanova V.S., Arutyunov Yu.I. a iné.Variabilita patogénu moru a problematika jeho diagnostiky / Ed. S.A. Lebedeva. - Rostov na Done: Antey, 2009. - 533 s.

Lebedeva S.A., Trukhachev A.L., Ivanova V.S., Arutyunov Yu.I. a kol. Diverzita infekčného agens moru a problémy jeho diagnostiky / Ed. od S.A. Lebedeva. -Rostov na Done: Antei, 2009. - 533 s. (v ruštine)

6. Menšikov V.V. a iné Laboratórne metódy výskumu na klinike. - M.: Medicína, 1987. - 365 s.

Menshikov V.V. a kol. Laboratórne metódy výskumu na klinike. - Moskva: Medicina, 1987. - 365 s. (v ruštine)

Normálna serózna tekutina brušnej dutiny je číra a svetložltá, objem je menší ako 50 ml. Ak sa tekutina hromadí v brušnej dutine vo významných množstvách, nazýva sa to ascitická. Ascites je abdominálna vodnateľnosť, vodnateľnosť brucha, výrazné nahromadenie voľnej tekutiny (zvyčajne transudátu) v brušnej dutine. Ascites sa môže objaviť náhle (napríklad pri trombóze portálnej žily) alebo sa môže vyvinúť postupne počas niekoľkých mesiacov, sprevádzaný plynatosťou, ktorá môže spočiatku dominovať v klinickom obraze. Niekedy sa v peritoneálnej dutine nahromadí 8 až 30 litrov ascitickej tekutiny. Počas fyzikálneho vyšetrenia pacienta možno ascites rozpoznať, ak je v peritoneálnej dutine aspoň 1 liter tekutiny.

ZÍSKAVANIE A SPRACOVANIE MATERIÁLU PRE LABORATÓRNY VÝSKUM
Serózna tekutina brušnej dutiny sa získava punkciou rektálnej dutiny (Douglasov vak) (kuldocentéza), perkutánnou punkciou (paracentéza) alebo laparoskopiou.

Súčasne sa má odobrať 5 ml venóznej krvi na stanovenie gradientu sérovo-ascitickej tekutiny pre albumín a iné biochemické parametre.

Ihneď po doručení vzorky do laboratória je vhodné vykonať cytologické vyšetrenie ascitickej tekutiny. Ak núdzová analýza nie je možná, vzorka by sa mala uchovávať v chladničke maximálne 12 hodín s použitím heparínu alebo citrátu sodného ako antikoagulantu.

KLINICKÁ A DIAGNOSTICKÁ HODNOTA ZMIEN V INDIKÁTOROCH SEROZÁLNEJ TEKUTINY V BRUŠNEJ DUTINE
Hlavné ciele laboratórnej analýzy ascitickej tekutiny sú:
stanovenie benígnej alebo malígnej povahy výpotku;
diferenciácia neinfikovanej/infikovanej tekutiny.

Ascites pri portálnej hypertenzii, hepatocelulárnej rakovine a pečeňových metastázach bez šírenia po peritoneu je transudát.

Ascites pri ochoreniach pečene, pri pankreatitíde, peritoneálnej tuberkulóze a pri malígnych nádoroch s metastázami v pobrušnici je spravidla výsledkom exsudátu.

Na diferenciálnu diagnostiku portálneho a malígneho (peritoneálne metastázy) typu ascitu boli vyvinuté vhodné laboratórne kritériá. Hlavnými laboratórnymi ukazovateľmi delenia ascitu na exsudát a transudát v neprítomnosti malígnych buniek sú obsah albumínu, hladina cholesterolu a fibronektínu. Transudát sa vyznačuje vysokým gradientom albumínu medzi sérom a ascitickou tekutinou (>11 g/l), naopak, pre exsudát obsahuje ascitická tekutina veľké množstvo albumínu a gradient albumínu medzi ascitickou tekutinou a sérom je nevýznamný (
V prípade chylóznej ascitickej tekutiny je indikované stanovenie triglyceridov v nej a elektroforéza lipoproteínov. Hladina karcinoembryonálneho antigénu vyššia ako 2,5 μg/l ascitickej tekutiny má vysokú klinickú špecificitu a prognostickú hodnotu blízku 100 % pre nádor s metastázami v pobrušnici.

Pri testovaní albumínu je potrebné súčasne odobrať vzorky séra a ascitickej tekutiny. Koncentráciu albumínu v ascitickej tekutine je potrebné stanoviť imunonefelometrickými alebo imunoturbidimetrickými metódami. Fotometrické stanovenie albumínu s brómkrezolovou zeleňou dáva pri koncentráciách albumínu viac ako 7 g/l nafúknuté výsledky, preto táto metóda nie je vhodná na stanovenie gradientu albumínu. Celková hladina bielkovín viac ako 30 g/l na diagnostiku transudátu má diagnostickú špecificitu 86 % a diagnostickú špecificitu 83 %.

Počítanie buniek a diferenciácia na stanovenie neutrofilných granulocytov sa uskutočňuje v EDTA ascitickej tekutine. Ak je vo vzorke prítomná krv, je potrebné určiť:
pomer červených krviniek k bielym krvinkám na posúdenie možnosti krvácania z gastrointestinálneho traktu alebo prímesi „cestovnej“ krvi;
počet leukocytov (vysoký relatívna suma indikuje zápalový proces);
obsah neutrofilných granulocytov (ascites s prevahou a absolútnym obsahom neutrofilov viac ako 250/μl je klasifikovaný ako infekčný).

Ak nie je možné vykonať cytologické vyšetrenie do 12 hodín, vzorka sa môže uchovávať v chladničke do 2 dní, materiál je však potrebné fixovať pridaním 50% alkoholu v pomere 1:1.
Stanovenie patogénnej mikroflóry v ascitickej tekutine sa uskutočňuje rovnakým spôsobom ako v krvi - kultiváciou za aeróbnych a anaeróbnych podmienok.

VŠEOBECNÉ VLASTNOSTI (MAKROSKOPICKÝ POHĽAD NA KVAPALINU)
Ascitická (peritoneálna) tekutina má často serózny charakter, menej často hemoragická, chilózna a hlienovitá. Svetlá, priehľadná alebo žltkastá ascitická tekutina je často transudát. Zakalená serózna tekutina je charakteristická pre peritonitídu, ktorá sa vyskytuje ako komplikácia apendicitídy, pankreatitídy, črevnej obštrukcie alebo primárnej bakteriálnej infekcie. Zelenkastá farba, sfarbenie žlče sa vyskytuje pri perforácii žlčníka alebo žiarovky dvanástnik, tenké črevo, ako aj cholecystitída, akútna pankreatitída. Ascitická tekutina nadobúda zelenkastú farbu, keď koncentrácia bilirubínu v nej prekročí 100 µmol/l. Ak je koncentrácia bilirubínu v ascitickej tekutine vyššia ako v sére, je to dôkaz perforácie žlčovodu alebo močového mechúra. Mliečny vzhľad seróznej tekutiny (chylózny výpotok) sa objavuje, keď je v ascitickej tekutine veľké množstvo chylomikrónov. Stáva sa to najčastejšie pri poškodení alebo nepriechodnosti hrudného lymfatického kanálika spôsobeného tuberkulózou, cirhózou pečene a môže sa vyskytnúť pri leukémii (lymfóme). Pseudochylová infúzia je možná, keď sa pacientom podávajú veľké objemy krvných náhrad.

Hemoragická serózna tekutina brušnej dutiny sa môže objaviť pri abdominálnej traume s prasknutím vnútorných orgánov, najmä s prasknutím vajcovodu s mimomaternicovým tehotenstvom, ako aj s šírením malígneho nádoru pozdĺž seróznej membrány. Kvapalina má šarlátovú farbu kvôli prímesi „cestovnej“ krvi počas paracentézy. Ascitická tekutina získava hnedú farbu v dôsledku krvácania do brušnej dutiny pri tuberkulóznej peritonitíde, metastázach do pobrušnice a po traumatických poraneniach brušných orgánov. Pri integrálnom hodnotení stavu pacientov s peritonitídou sa používa Mannheimský peritoneálny index, pri výpočte ktorého je jedným z najvýznamnejších ukazovateľov charakter exsudátu.

BIOCHEMICKÉ UKAZOVATELE
Koncentráciu celkového proteínu v ascitickej tekutine ovplyvňujú najmä tieto faktory:
koncentrácia celkového proteínu v krvnom sére, s ktorou má hladina proteínu v ascitickej tekutine priamy vzťah;
úroveň portálnej hypertenzie, ktorá má inverzný vzťah. Okrem toho je ovplyvnená koncentrácia celkového proteínu v ascitickej tekutine
užívanie diuretík.

Indikácie na stanovenie celkového proteínu v ascitickej tekutine sú:
profylaktické podávanie antibiotík na prevenciu bakteriálnej peritonitídy;
diferenciálna diagnostika primárnej a sekundárnej (zavlečenej) bakteriálnej peritonitídy;
ascites pri srdcovom zlyhaní.

Celkový proteín
Pri prahovej hodnote celkového obsahu bielkovín v ascitickej tekutine 25 g/l sú klasické predstavy o separácii transudátu a exsudátu na základe proteínovej exsudácie potvrdené len na 56 %, t.j. nemajú prakticky žiadne laboratórne potvrdenie. Je to spôsobené tým, že celkový obsah bielkovín je nízky pri infekčnej etiológii ascitu, hoci exsudatívna povaha ascitu je nepopierateľná. Na druhej strane, celkový obsah bielkovín v ascitickej tekutine je vysoký u pacientov so srdcovým zlyhaním, u ktorých sa ascitická tekutina považuje za transudát.

Celková koncentrácia proteínu vyššia ako 30 g/l indikuje exsudát s klinickou senzitivitou 93 % a špecificitou 85 %. Hodnota pomeru bielkovín väčšia ako °-5 označuje exsudát s klinickou senzitivitou 93 % a špecificitou 85 %. Pri ascite spôsobenom zhubnými nádormi, s výnimkou hepatocelulárneho karcinómu, je koncentrácia celkových bielkovín 49-65 g/l, pri cirhóze pečene a hepatocelulárnom karcinóme v rozmedzí 17-21 g/l. Pacienti s cirhózou pečene a hladinami bielkovín v ascitickej tekutine menej ako 15 g/l majú zlú prognózu. Nízka hladina bielkovín v ascitickej tekutine je charakteristická pre infekčnú povahu ascitu, pričom súčasne so sekundárnou bakteriálnou infekciou a tuberkulóznou peritonitídou je v ascitickej tekutine konštantne stanovená hladina bielkovín nad 30 g/l.

Albumín
Gradient albumínu medzi sérom a ascitickou tekutinou je určený úrovňou portálnej hypertenzie. Pacienti s gradientom albumínu vyšším ako 11 g/l majú portálnu hypertenziu, ale pacienti s gradientom nižším ako 11 g/l nie. Pri cirhóze pečene s portálnou hypertenziou má albumínový gradient viac ako 11 g/l klinickú špecificitu 97 %. Ascites zmiešaného typu - v dôsledku cirhózy pečene a metastáz v pobrušnici alebo cirhózy pečene a tuberkulóznej peritonitídy - sú tiež sprevádzané gradientom albumínu nad 11 g/l.

Na rozlíšenie transudátu od exsudátu je gradient albumínu dôležitejší ako celkový proteín. Treba mať na pamäti, že pri použití diuretík alebo paracentézy sa hladiny albumínu a celkového proteínu v ascitickej tekutine menia.

U pacientov s rozsiahlou peritonitídou je stupeň zníženia koncentrácie sérového albumínu vysoko informatívnym prognostickým ukazovateľom, ktorý umožňuje posúdiť závažnosť ochorenia a riziko nepriaznivého výsledku. K zníženiu hladiny albumínu v krvi dochádza jednak v dôsledku zvýšeného katabolizmu proteínov, ktorý je charakteristický pre akútnu fázu akéhokoľvek zápalový proces, a v dôsledku exsudácie do brušnej dutiny. Peritoneálny exsudát obsahuje značné množstvo bielkovín. Predpokladá sa, že až 50% všetkej extracelulárnej tekutiny tela sa môže presunúť do brušnej dutiny. S rozvojom edému sa proces absorpcie tekutiny peritoneom najskôr zrýchľuje, ale potom sa v dôsledku narušenia mikrocirkulácie prudko spomalí - hromadí sa exsudát. Určité množstvo bielkovín, vrátane albumínu, uvoľnené z krvného obehu, sa stráca do tela; vysoký proteínový výpotok vedie k hypoalbuminémii. Okrem toho vždy dochádza k výraznému opuchu pre- a retroperitoneálneho tkaniva a iných tkanív v dôsledku pôsobenia biologicky aktívnych látok: enzýmov, kinínov, histamínu, vďaka čomu sa albumín ukladá v tkanivách. Spolu so znížením syntézy (albumín je negatívnym reaktantom akútnej fázy zápalu) a zvýšením rozpadu (prevaha katabolických procesov v organizme) dochádza k uvoľňovaniu albumínu do brušnej dutiny a jeho ukladaniu v edematóznych tkanivách. hlavnou príčinou prognosticky nepriaznivého javu - zníženie koncentrácie albumínu v krvnom sére.

Prienik albumínu z krvi do výpotku je charakterizovaný hodnotou celkovej koncentrácie albumínu vo výpotku. Vo väčšine prípadov je celková koncentrácia albumínu vo výpotku v úzkej korelácii s hodnotou celkovej koncentrácie albumínu vo výpotku (koncentrácia albumínu v krvnom sére). V prípadoch, keď je celková koncentrácia albumínu vo výpotku >34 g/l a celková koncentrácia albumínu vo výpotku je signifikantne nižšia ako koncentrácia albumínu v celkovom výpotku, pacienti majú mierny pooperačný priebeh; výsledok ochorenia je priaznivý; drenážny výtok je nevýznamný.

V prípadoch výrazných rozdielov v stave albumínu vo výpotku a sére hodnota celkovej koncentrácie albumínu vo výpotku nesúvisí s koncentráciou albumínu v krvi; Je zrejmé, že existuje proteolytický účinok na albumín v exsudáte, čo vedie k jeho zmene a deštrukcii. V iných prípadoch absolútna hodnota celkovej koncentrácie albumínu vo výpotku závisí od hodnoty celkovej koncentrácie albumínu vo výpotku, a nie od aktivity zápalového procesu v brušnej dutine. Na charakterizáciu závažnosti zápalového procesu v brušnej dutine je vhodný pomer celkovej koncentrácie albumínu vo výpotku, ktorý charakterizuje stupeň priepustnosti cievnej steny k albumínu. Parameter celkovej koncentrácie albumínu vo výpotku odráža závažnosť stavu pacienta a parameter celkovej koncentrácie albumínu vo výpotku odzrkadľuje závažnosť zápalového procesu v brušnej dutine.

Endotoxín
U pacientov s fekálnou peritonitídou (perforácia hrubého čreva) môže koncentrácia endotoxínu v peritoneálnej tekutine dosiahnuť 1000 mcg/l. Pri difúznej bakteriálnej peritonitíde sú koncentrácie endotoxínu zvyčajne relatívne nízke. Ak v pooperačné obdobie Mikroflóra hrubého čreva naďalej preniká do brušnej dutiny (endotoxín v peritoneálnej tekutine sa zvyšuje), je to veľmi veľká hrozba difúznej peritonitídy a smrti pacienta.

Glukóza
Pri nebakteriálnej peritonitíde je pomer glukóza-ascitická tekutina/glukóza v plazme vyšší ako 1, pri bakteriálnej peritonitíde je táto hodnota nižšia ako 1. Pre bakteriálnu peritonitídu je charakteristická koncentrácia glukózy v ascitickej tekutine nižšia ako 2,8 mmol/l. Vo väčšine prípadov tuberkulóznej peritonitídy je koncentrácia glukózy v ascitickej tekutine nižšia ako 1,7 mmol/l. Znižuje sa aj pri zhubných nádoroch s metastázami, ktoré sú príčinou ascitu.

BAKTERIOLOGICKÁ ŠTÚDIA
Keď je peritoneálna tekutina infikovaná monokultúrou, kultivačné štúdie majú klinickú citlivosť viac ako 85-90%, zatiaľ čo taký ukazovateľ, ako je obsah neutrofilných granulocytov/μl viac ako 250, je súčasne iba 50%. Bakteriologické štúdie ukazujú, že v 70% prípadov existuje gramnegatívna mikroflóra, zvyčajne E. coli, v 20% prípadov - grampozitívna.

Etiologický význam anaeróbne mikroorganizmy osvedčené pri všetkých komplikovaných vnútrobrušných infekciách, kde sú súčasťou polymikrobiálnych asociácií. Clostridium perfringens a Clostridium septicum sa podieľajú na rozvoji sekundárnej peritonitídy, intraabdominálneho abscesu a sepsy počas perforácie hrubého čreva a terminálneho ilea. Pri komplikovaných nádoroch hrubého čreva má 70 – 85 % pacientov bakteriémiu spôsobenú Clostridium septicum. Pri apendicitíde sa Bilophila wadsworthia izoluje z efúznej tekutiny. Zmiešané infekcie často zahŕňajú Peptococcus spp., Peptostreptococcus spp. Vyskytujúce sa v 90-95% prípadov, Actinomyces spp., Prevotella spp., Lactobacillus spp., Fusobacterium spp. najťažšie v diagnostike a liečbe aktinomykotických pečeňových abscesov. Bacteroides, predovšetkým Bacteroides fragilis a Bacteroides thetaiotaomicron, majú hlavný význam pri intraabdominálnych infekciách. Frekvencia izolácie Bacteroides fragilis pri sekundárnej peritonitíde dosahuje 22,8-44,5%. Existujú dôkazy o etiologickom význame anaeróbov pri primárnej peritonitíde. U všetkých pacientov s infekciami žlčových ciest so známkami biliárnej hypertenzie alebo endoprotézami, ktoré zabezpečujú priechodnosť spoločného žlčovodu, sú izolované Clostridium perfringens a Bacteroides fragilis. Pri pankreatitíde patria medzi izolované patogény v 5 – 14 % prípadov bakteroidy a klostrídie. V prípade nozokomiálnej intraabdominálnej infekcie je významná asociácia multirezistentných enterobaktérií, Pseudomonas aeruginosa, enterokokov a anaeróbov. Infekcie rán u pacientov po brušných zákrokoch spôsobujú Bacteroides spp. v 3,9 %, Clostridium perfringens v 1,1 %. Rozvoj peritonitídy a úmrtnosť počas intraabdominálnej infekcie sú spôsobené gramnegatívnymi aeróbmi a tvorba intraabdominálnych abscesov u preživších je spôsobená anaeróbnou mikroflórou.

Progredujúci mikrobiálny zápalový proces v brušnej dutine (na pozadí operačnej traumy, zníženej odolnosti tela atď.) prebieha veľmi rýchlo a v priebehu 4-5 dní môže dosiahnuť štádium vyžadujúce chirurgická intervencia. Dynamika procesu, vysoká pravdepodobnosť reinfekcie a rozvoj rezistencie mikroflóry si vyžadujú empirické predpisovanie antibakteriálnej terapie súčasne s indikatívnou mikrobiologickou expresnou analýzou (mikroskopia, plynová chromatografia) a hodnotenie citlivosti mikroorganizmov v klinickom materiáli pomocou diskov. antibiotikami a neustále sledovanie bakteriologickej situácie v mieste zápalu. Rutinná metóda bakteriologickej kultivácie umožňuje získať výsledky 24-72 hodín po začiatku štúdie, identifikovať povahu patogénnej mikroflóry, potvrdiť správny výber antibakteriálnej terapie alebo navrhnúť potrebu jej korekcie. Neustály mikrobiologický monitoring je nevyhnutný, pretože mikrobiologická situácia v mieste infekcie sa môže počas patologického procesu výrazne meniť a vyžadovať zmeny v terapii.

ŠTÚDIA KRVNÝCH BUNIEK
Červené krvinky v EDTA-ascitickej tekutine
Peritoneálna tekutina na výplach obsahuje menej ako 25 000 červených krviniek/µl. V ascitickej tekutine sa červené krvinky hromadia po úrazoch alebo sú prejavom tuberkulóznych či malígnych lézií pobrušnice. Podobný pomer červených a bielych krviniek v ascitickej tekutine a krvi naznačuje iatrogénne poškodenie („prechod“ krvi) alebo krvácanie do brušnej dutiny.

Leukocyty
Stanovenie leukocytov v peritoneálnej tekutine sa môže uskutočniť kvantitatívne počítaním v Goryaevovej komore alebo semikvantitatívne - pomocou diagnostických prúžkov s použitím testovacej zóny na stanovenie leukocytov. Citlivosť testovacej zóny na leukocyty je 3000 buniek/μl. Diagnostická senzitivita detekcie leukocytov metódou „suchej chémie“ v peritoneálnej tekutine je 88 %, špecificita je 94 %.

Počet leukocytov v ascitickej tekutine, pH a koncentrácia laktátu v infikovanej ascitickej tekutine sa výrazne líšia od hodnôt týchto ukazovateľov v sterilnom ascite, avšak všetky tieto hodnoty sa menia približne rovnako a nie je možné ich rozlíšiť. medzi ascitom pri nádore a infekčnou peritonitídou.

Relatívny obsah neutrofilných granulocytov viac ako 25 % leukocytovej populácie ascitickej tekutiny sa považuje za patologický a charakteristický pre bakteriálnu peritonitídu. U pacientov s cirhózou pečene je počet leukocytov v ascitickej tekutine nepriamo úmerný objemu tekutiny. Počet leukocytov v ascitickej tekutine sa zvyšuje so znížením objemu ascitu v dôsledku liečby diuretikami, zatiaľ čo relatívny obsah neutrofilov v leukocytovom vzorci sa nemení.

Ak je počet bielych krviniek vyšší ako 500/µl, najmä ak je počet granulocytov vyšší ako 250/µl, pravdepodobnosť primárnej bakteriálnej peritonitídy je vysoká. IN v tomto prípade Diagnostická špecificita potvrdenia tejto diagnózy je 93 %, senzitivita 84 %. Pri rakovine pankreasu a hepatocelulárnej rakovine sa vyskytuje stredná leukocytóza - 300-1000 / μl. Pri alkoholickej cirhóze sa počet leukocytov v ascitickej tekutine zvyšuje na 1100-21 000/µl.

Lymfocytóza v ascitickej tekutine je znakom dlhotrvajúcej kongestívnej exsudácie, chronického zápalu, tuberkulózy alebo nádorového procesu. U pacientov s cirhózou pečene a chylóznou ascitickou tekutinou sa relatívny obsah lymfocytov v nej pohybuje od 12 do 96 %, v priemere 70 %.

Nádorové markery
Sacharidový antigén 19-9
V ascitickej tekutine pri prahovej hodnote (diskriminačná hladina) 30 U/ml je diagnostická senzitivita malígneho nádoru 52 %, diagnostická špecificita 100 %.

Karcinoembryonálny antigén
Štúdium karcinoembryonálneho antigénu v ascitickej tekutine umožňuje odlíšiť benígne a malígne ochorenia s diagnostickou špecificitou a senzitivitou 83 %. Pri prahovej hodnote karcinoembryonálneho antigénu 2,5 μg/ml je diagnostická senzitivita 45 %, diagnostická špecificita 100 %. Ak sa stanovenie karcinoembryonálneho antigénu v ascitickej tekutine spojí s testovaním na prítomnosť nádorových buniek, diagnostická senzitivita sa v prípade zhubného nádoru zvyšuje na 80 %. Treba poznamenať, že štúdium karcinoembryonálneho antigénu v ascitickej tekutine má malý význam pre diagnostiku difúzneho malígneho mezoteliómu: karcinoembryonálny antigén sa deteguje iba v 1-9% prípadov tejto patológie. Karcinoembryonálny antigén sa zároveň deteguje v 80 % prípadov ascitu spojeného s nádorovými léziami pri rakovine žalúdka, prsníka a pľúc.

CYTOLOGICKÝ VÝSKUM
Najvyššia analytická citlivosť sa dosahuje cytologickým vyšetrením preparátov farbených podľa Pappenheima a Leishmana, a ak je to potrebné, dodatočným cytochemickým vyšetrením. Diagnostická citlivosť detekcie nádorových buniek pod svetelným mikroskopom je 40-70%. Ak je možné získať bunky z 200 ml a viac ascitickej tekutiny, diagnostická senzitivita sa zvyšuje na 70 – 90 % s takmer 100 % diagnostickou špecificitou. Niekedy laboratórna detekcia nádorových buniek v ascitickej tekutine predchádza klinickej manifestácii nádoru o 3 roky alebo viac.

U žien sa nádorové bunky v ascitickej tekutine v zostupnom poradí častejšie nachádzajú v nádoroch pohlavného ústrojenstva, najmä vaječníkov, ďalej v karcinóme prsníka a tráviaceho traktu. U mužov je diseminácia pozdĺž pobrušnice najčastejšie určená pri nádoroch tráviaceho traktu a leukémii. Približne v 80 % prípadov je nádorom adenokarcinóm. Medzi patologickými procesmi, ktoré sú charakteristické pre lézie pobrušnice a prakticky sa nevyskytujú v pohrudnici a osrdcovníku, je potrebné poznamenať pseudomyxoma peritonea.

Postihnutie pobrušnice sa pozoruje pri tumore produkujúcom hlien, najčastejšie hraničnom mucinóznom tumore ovária alebo mukokély apendixu, ako aj pri dobre diferencovanom mucinóznom adenokarcinóme ovária alebo apendixu. Predpokladá sa, že lézia sa môže vyvinúť, keď cystický nádor praskne a dôjde k celkovému šíreniu nádorových buniek v brušnej dutine. Zároveň sa v brušnej dutine hromadí veľké množstvo hlienu, ktorý je pre vysokú hustotu ťažko odsávateľný. Stery z aspirátu z pseudomyxoma peritonei obsahujú veľké množstvo pozitívneho hlienu, ktorý je odolný voči hyaluronidáze. Nádorových buniek je zvyčajne málo alebo sa nenachádzajú v niekoľkých vzorkách, takže na stanovenie diagnózy je často potrebné pozrieť sa na niekoľko náterov alebo vykonať opakovanú punkciu.

Na stanovenie benígnej alebo malígnej povahy lézie by ste mali byť veľmi opatrní. Pri benígnej lézii sú bunky malej veľkosti, s malými tmavými jadrami, stredne hojnou cytoplazmou a cytoplazma obsahuje vakuoly. Hlien často obsahuje vlákna fibrocytov. Malígny proces nemožno uzavrieť iba na základe detekcie veľkého množstva hlienu, pretože môže byť výsledkom prasknutia mukokély apendixu alebo benígneho mucinózneho cystadenómu vaječníka. Osobitná opatrnosť je potrebná v prípadoch, keď sa hlien z nezhubného nádoru kombinuje so skupinami mezoteliálnych buniek s reaktívnymi zmenami. Aby sa zistila povaha lézie, bunky produkujúce hlien by sa mali starostlivo vyšetriť na prítomnosť alebo absenciu príznakov malignity.