Как сосчитать анализ перитонеальной жидкости. Успехи современного естествознания

Перитонеальную жидкость для исследования получают путем парацентеза. Парацентез выполняют с помощью троакара и канюли, которые вводят через брюшную стенку под местной анестезией. Если перитонеальную жидкость эвакуируют с лечебной целью, канюлю троакара присоединяют к дренажной системе. Однако, если необходимо получить лишь небольшое количество перитонеальной жидкости для исследования, можно воспользоваться как троакаром, так и пункционной иглой 18-го калибра. При пунктировании всех четырех квадрантов живота аспирируют перитонеальную жидкость из каждого квадранта, что важно для диагностики повреждений органов живота при травмах и своевременного хирургического вмешательства.

Следует объяснить пациенту, что исследование позволяет уточнить причину асцита или диагностировать повреждение органов живота при травме.
Каких-либо ограничений в диете и режиме питания не требуется.
Следует сообщить пациенту, что при исследовании будет взята проба перитонеальной жидкости, пункция брюшной стенки будет выполнена под местной анестезией, которая уменьшит неприятные ощущения, и что исследование обычно длится примерно 45 мин.
Для снятия тревоги у пациента его следует успокоить, заверив, что осложнения при этом исследовании наблюдаются очень редко.
Если у пациента асцит, следует сказать ему, что эвакуация асцитической жидкости улучшит самочувствие и облегчит дыхание.
Необходимо проследить, чтобы пациент или его родные дали письменное согласие на исследование.
Перед исследованием определяют исходные основные физиологические показатели, массу тела и измеряют окружность живота.
Пациента следует предупредить, что при необходимости у него возьмут кровь на исследование.
Перед исследованием пациент должен помочиться, что важно для профилактики случайного повреждения мочевого пузыря пункционной иглой или троакаром.
Перед исследованием также выполняют обзорный рентгеновский снимок живота.

Пациента усаживают на кровати или в кресле так, чтобы стопы его удобно располагались на полу, а спине была обеспечена надежная опора. Если пациенту трудно находиться вне постели, высоко поднимают головной отдел кровати (высокое положение Фаулера) и просят пациента устроиться поудобнее.
Пациента укрывают для предупреждения озноба, оставляя открытым лишь место пункции.
Чтобы предотвратить промокание постельного белья и излития перитонеальной жидкости на пациента, используют пластиковую клеенку.
Волосы в области пункции сбривают, кожу обрабатывают дезинфицирующим раствором и обкладывают стерильным пеленками.
Место пункции обезболивают раствором местного анестетика.
Врач вводит пункционную иглу или троакар с канюлей на уровне 2,5-5 см ниже пупка, однако прокол брюшной стенки можно сделать также в подвздошной области, у края прямой мышцы живота, в боковом отделе или в каждом из четырех квадрантов живота.
При использовании троакара с канюлей для облегчения их введения через брюшную стенку на коже делают небольшой разрез. Проникновение иглы в брюшную полость сопровождается характерным звуком. После извлечения троакара с помощью 50-миллилитрового шприца аспирируют перитонеальную жидкость. Если необходимо эвакуировать большее количество перитонеальной жидкости, шприц соединяют с помощью трубки от системы для внутривенных вливаний с пластиковым мешком. Эвакуировать можно не более 1500 мл перитонеальной жидкости. Если жидкость оттекает с трудом, следует ввести троакар с канюлей или пункционную иглу в другом месте брюшной стенки.
После эвакуации перитонеальной жидкости канюлю или иглу извлекают и место пункции придавливают стерильной салфеткой, иногда накладывают один шов на кожную рану.
Образцы перитонеальной жидкости нумеруют в той последовательности, в какой они были получены. Если пациент получает антибиотики, это отмечают в бланке направления в лабораторию.
Аккуратно, с соблюдением существующих инструкций убирают использованные инструменты, материал для разового пользования упаковывают в специальный контейнер для последующего уничтожения.
На место пункции накладывают стерильную марлевую повязку. Она должна быть многослойной, чтобы впитывать вытекающую перитонеальную жидкость. Повязку следует периодически осматривать (например, при каждом определении основных физиологических показателей) и при необходимости менять или закреплять.
Следует периодически определять основные физиологические показатели, при нестабильном состоянии пациента их определяют каждые 15 мин. Пациента взвешивают и измеряют окружность живота, после чего сравнивают результаты с исходными.
Пациенту обеспечивают покой и по возможности воздерживаются от лечебных и других процедур, которые могут вызвать у него стресс (например, смена постельного белья).
Следят за диурезом в течение 24 ч, наличие гематурии свидетельствует о повреждении мочевого пузыря.
При эвакуации значительного количества перитонеальной жидкости возрастает риск коллапса, поэтому следует особенно внимательно отнестись к таким симптомам, как бледность кожных покровов, учащение пульса и дыхания, снижение артериального давление и центрального венозного давления, нарушение сознания, жалобы на головокружение. В таких случаях, если пациент в сознании, ему дают пить жидкости.

В связи с отмеченными выше особенностями, вводя пациентам внутривенно жидкости и альбумин, определяют содержание электролитов (особенно натрия) и белка в сыворотке.

Особенности перитонеальной жидкости в норме.

Общие признаки и компоненты	Значение
Общие признаки	Стерильная, прозрачная или бледно-желтая жидкость без запаха, в количестве не более 50 мл
Эритроциты	Отсутствуют
Лейкоциты	Менее 300 в 1 мкл
Белок	0,3-4,1 г/дл (СИ: 3-4,1 г/л)
Глюкоза	70-100 мг/дл (СИ: 3,5-5 ммоль/л)
Амилаза	138-404 ЕД/л
Аммиак	Менее 50 мг/дл (СИ: менее 29 мкмоль/л)
Щелочная фосфатаза	Мужчины старше 18 лет: 90-239 ЕД/л Женщины до 45 лет: 76-196 ЕД/л Женщины старше 45 лет: 87-250 ЕД/л
Опухолевые клетки (цитологическое исследование)	Отсутствуют
Бактерии	Отсутствуют
Грибы	Отсутствуют

Мутная перитонеальная жидкость наблюдается при перитоните, обусловленном первичной бактериальной инфекцией, разрывом кишечника в результате травмы, панкреатитом, инфарктом кишечника, странгуляционной непроходимостью, аппендицитом. Кровянистая перитонеальная жидкость наблюдается при доброкачественных и злокачественных опухолях, геморрагическом панкреатите или повреждении сосуда при введении троакара в брюшную полость Зеленоватая перитонеальная жидкость, обусловленная присутствием в ней желчи, указывает на разрыв желчного пузыря, острый панкреатит, перфорацию кишечника или язву двенадцатиперстной кишки.

Наличие в перитонеальнои жидкости более 100 эритроцитов в 1 мкл (СИ: 100-106/л) свидетельствует об опухоли или туберкулезе при травме живота с повреждением внутренних органов количество эритроцитов превышает 100 000 в 1 мкл (СИ: 100-109/л) Повышенное количество лейкоцитов в перитонеальной жидкости, более 25% которых составляют нейтрофилы, наблюдается у 90% больных спонтанным бактериальным перитонитом и у 50% больных циррозом печени. Высокое содержание лимфоцитов характерно для больных туберкулезным перитонитом или хилезным асцитом. Большое количество мезотелиальных клеток в перитонеальной жидкости также характерно для туберкулезного перитонита. Уровень белка более 3 г/дл (СИ: 30 г/л) наблюдается при злокачественных опухолях, более 4 г/дл (СИ: 40 г/л) - при туберкулезе. Низкий уровень глюкозы в перитонеальной жидкости наблюдается у больных с туберкулезным перитонитом и карциноматозом брюшины.

Активность щелочной фосфатазы в перитонеальной жидкости увеличивается более чем в 2 раза по сравнению с нормальной активностью в сыворотке крови у пациентов с разрывом кишечника и странгуляционной тонкокишечной непроходимостью. Более чем двукратное увеличение уровня аммиака по сравнению с нормальным уровнем в сыворотке крови отмечается при разрыве кишечника и странгуляционной тонкокишечной или толстокишечной непроходимости, при прободной язве и прободном аппендиците Отношение содержания белка в перитонеальной жидкости к его содержанию в сыворотке крови, равное или превышающее 0,5, характерно для злокачественной опухоли, туберкулезного или панкреатического асцита и свидетельствует о внепеченочной причине асцита. Отношение меньше 0,5 свидетельствует о неосложненном циррозе печени. Градиент между уровнем альбумина в асцитической жидкости и сыворотке крови более 1 г/дл (СИ: более 10 г/л) указывает на хронический гепатит, градиент менее 10 г/л характерен для злокачественной опухоли. Цитологическое исследование перитонеальной жидкости позволяет обнаружить опухолевые клетки, микробиологическое исследование — кишечную палочку, анаэробы и энтерококки, которые проникают в брюшную полость при разрыве полого органа, воспалительных процессах внутренних органов (аппендицит, панкреатит), туберкулезе, заболеваниях яичников. Выявление грамположительных кокков свидетельствует обычно о первичном перитоните. При гистоплазмозе, кандидозе или кокцидиоидомикозе в перитонеальной жидкости обнаруживают грибы.

С помощью двумерного электрофореза и времяпролетной масс-спектрометрии изучен протеомный профиль перитонеальной жидкости при наружном генитальном эндометриозе. Выявлены белки отличия, появляющиеся при наружном генитальном эндометриозе: аполипопротеин А-IV, глобулин, связывающий половые гормоны, компоненты системы комплемента С3 и С4b. К числу белков, отсутствующих при наружном генитальном эндометриозе, относятся фактор дифференцировки пигментного эпителия, транстиретин, гаптоглобин, α-1-антитрипсин и ингибитор апоптоза 6. Обсуждается возможное значение идентифицированных белков в развитии основных нарушений при эндометриозе. Обнаруженные белки отличия могут быть использованы в качестве маркеров этого заболевания.

наружный генитальный эндометриоз

перитонеальная жидкость

протеомный анализ

белки отличия

1. Адамян, Л.В. Эндометриозы: руководство для врачей / Л.В. Адамян, В.И. Кулаков, Е.Н. Андреева // М.: Медицина, 2006. – 416 с.

2. Говорун, В.М. Протеомные технологии в современной биомедицинской науке / В.М. Говорун, А.И. Арчаков // Биохимия. – 2002.– № 10.– С.1341–1359.

3. Дедуль, М.И. Система протеолиза в сыворотке крови и перитонеальной жидкости при хирургическом лечении больных эндометриозом / М.И. Дедуль, Л.Е. Радецкая, Л.Н. Кирпиченок // Новости хирургии. – 2006. – № 3. – С.74-80.

4. Ищенко, А.И. Эндометриоз: диагностика и лечение / А.И. Ищенко, Е.А. Кудрина // М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002. – 104 с.

5. Линде, В.А. Протеомные технологии в изучении эндометриоза / В.А. Линде, Л.Р. Томай, В.О. Гунько и др. // Мед. вестн. Юга России. – 2013. – № 4. – С.12-16.

6. Минкевич, Н.И. PEDF-неингибиторный серпин с нейропротекторной и антиангиогенной активностями / Н.И. Минкевич, В.М. Липкин, И.А.Костанян // ActaNaturae. – 2010. – № 3. – С.74-84.

7. Bedaiwy, M.A. Peritoneal fluid environment in endometriosis. Clinicopathological implications / M.A. Bedaiwy, T.Falcone // Minerva Ginecol. –2003. – V.55, N 4. – P.333-345.

8. Bernard, K.R. Methods in functional proteomics: two-dimensionalpolyacrylamide gel electrophoresis with immobilized pH gradients, in-gel digestion and identification of proteins by mass spectrometry / K.R. Bernard, K.R. Jonscher, K.A. Resing, N.G.Ahn //Methods Mol. Biol. – 2004. –V. 250.– P. 263-282.

9. Hammond, G.L. Diverse roles for sex hormone-binding globulin in reproduction / G.L. Hammond // Biol. Reprod. – 2011. – V. 85, N 3. – P.431-441.

10. Kabut, J. Levels of complement components iC3b, C3c, C4, and SC5b-9 in peritoneal fluid and serum of infertile women with endometriosis / J. Kabut, Z. Kondera-Anasz, J. Sikora et al. // Fertil. Steril. –2007. – V.88, N 5. – P.1298-1303.

11. Richardson S.J. Cell and molecular biology of transthyretin and thyroid hormones / S.J. Richardson // Int. Rev. Cytol. – 2007. – V. 258. – P.137-193.

12. Sarrias M.R. A role for human Sp alpha as a pattern recognition receptor / M.R. Sarrias, S. Roselló, F. Sánchez-Barbero et al. // J. Biol. Chem. – 2005. – V. 280, N 42. – P. 35391-35398.

13. Spaulding H.L. Apo A-IV: an update on regulation and physiologic functions / H.L. Spaulding, E. Delvin, M. Lambert et al. // Biochim. Biophys. Acta. – 2003. – V.1631, N 2. – P.177-187.

14. Wassell J. Haptoglobin: function and polymorphism / J.Wassell // Clin. Lab. –2000. – V. 46, N 11-12. – P.547-552.

Актуальность изучения наружного генитального эндометриоза (НГЭ) связана с высокой частотой распростра-нения этой патологии среди женщин детородного возраста и ее существенным влиянием на их репродуктивное здоровье и уровень жизни . В настоящее время показана важная роль перитонеальной жидкости (ПЖ) в патогенезе эндометриоза, т.к. именно в ней происходит развитие и рост эндометриоидных очагов . Исследование белкового состава ПЖ с помощью протеомных технологий, направленных на изучение совокупности экспрессируемых геномом белков, создает качественно новые возможности для углубления представлений о молекулярных механизмах развития эндометриоза, его прогнозирования и ранней диагностики .

Цель работы . Изучить протеомный спектр ПЖ женщин с НГЭ и без НГЭ.

Материал и методы исследования

В исследование были включены 20 пациенток репродуктивного возраста (средний возраст 29,3±0,3 года), из них 10 пациенток с НГЭ с III-IV стадиями заболевания согласно классификации r-AFS (основная группа) и 10 - без эндометриоза (контрольная группа). Материалом исследования служила ПЖ, полученная из позади-маточного пространства при выполнении лапароскопии. Протеомный анализ ПЖ проводили с помощью двумерного электрофореза в полиакриламидном геле (приборы Protein IEFCell и ProteanIIxiMulti-Cell, Bio-Rad, США) с последующим окрашиванием белков ионами серебра . Идентификацию белков после их трипсинолиза проводили методом времяпролетной MALDI-масс-спектрометрии на масс-спектрометре AutoflexII (Bruker, Германия) с использованием программы MascotMSSearch (MatrixScience, США) и баз данных NCBI и Swiss-Prot.Результаты идентификации белков принимались как достоверные при уровне значимости не менее 95% и показателе сиквенс-покрытия не менее 60 %.

Достоверность различий в протеомном спектре ПЖ женщин контрольной и основной групп определяли с помощью c2-критерия (программа Statistica версия 6.0. фирмы StatSoft. Jnc.). Результаты оценивали как статистически значимые при p<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

В результате проведенного протеомного анализа ПЖ выявлен ряд белков отличия, присутствие или отсутствие которых имеет место только при НГЭ (см. табл., рис.). Так, в ПЖ женщин основной группы установлено появление следующих белков: аполипопротеина А-IV, глобулина, связывающего половые гормоны (ГСПГ), компонентов системы комплемента С3 и С4b, не обнаруженных у пациенток контрольной группы.

Таблица 1

Идентифицированные белки ПЖ женщин контрольной и основной групп

	Название белка
	α-1-антитрипсин
	Фактор дифференцировки пигментного эпителия
	Компонент системы комплементаC3
	Аполипопротеин A-IV
	Гаптоглобин
	Глобулин, связывающий половые гормоны
	Ингибитор апоптоза 6
	Компонент системы комплемента C4-b
	Транстиретин

Примечание: pI - изоэлектрическая точка, Mm-молекулярная масса, «+» - присутствие белка, «-» - отсутствие белка, p - достоверность отличий между группами.

А Б

Рис. 1. Протеомные карты перитонеальной жидкости женщин контрольной (А) и основной (Б) групп

Примечание. Нумерация белков соответствует таковой в таблице

Увеличение продукции (и, как следствие, появление в ПЖ) аполипопротеина A-IV, обладающего антиоксидантными и антиинфламаторными свойствами , очевидно, имеет компенсаторное значение в условиях окислительного стресса и воспаления, сопровождающих развитие данной патологии.

Повышенное содержание при эндометриозе ГСПГ, регулирующего биодоступность стероидных гормонов для эндометриальных клеток, создает условия для локальной гиперэстрогении . В этих условиях становится возможным усиление пролиферативного потенциала клеток эндометриоидных гетеротопий.

Усиление секреции перитонеальными макрофагами компонентов системы комплемента С3 и С4b, участвующими в воспалительной реакции, обезвреживании апоптозных клеток и иммунных комплексов, вносит определенный вклад в механизмы развития эндометриоза и эндометриоз-ассоциированного бесплодия .

Наряду с этими отклонениями при НГЭ в протеомном спектре ПЖ отсутствуют 5 белков: фактор дифференцировки пигментного эпителия, транстиретин, ингибитор апоптоза 6, гаптоглобин и α-1-антитрипсин.

Фактор дифференцировки пигментного эпителия является одним из наиболее мощных антиангиогенных и антипролиферативных факторов , поэтому угнетение его экспрессии может быть одной из причин, приводящих к снижению эндометриального апоптоза и усилению ангиогенеза, способствуя имплантации и росту гетеротопий.

Отсутствие в ПЖ женщин основной группы транстиретина, осуществляющего транспорт Т3 и Т4, по-видимому, создает локальный избыток гормонов щитовидной железы, токсическое действие которых приводит к поражению репродуктивных органов . Тиреоидные гормоны, модулируя эффекты эстрогенов на клеточном уровне, могут способствовать развитию нарушений гисто- и органогенеза гормоночувствительных структур и ухудшению течения эндометриоза .

Среди белков, не выявленных при НГЭ, важную роль в регуляции иммунного ответа выполняет секретируемый макрофагами ингибитор апоптоза 6 . Возможно, именно нарушение экспрессии этого белка приводит к формированию дисбаланса иммунокомпетентных клеток в ПЖ (за счет подавления апоптоза Т-лимфоцитов и NK-клеток).

Отсутствие в ПЖ неферментативного антиоксиданта гаптоглобина , можно полагать, вносит вклад в усиление окислительного стресса, развивающегося при эндометриозе.

При указанной патологии в ПЖ также не обнаружен α-1-антитрипсин - ингибитор сериновых протеаз, которые непосредственно вовлечены в процессы инвазии эндометриальных клеток , что, по-видимому, обусловливает дисбаланс в системе протеаза-ингибитор, способствуя имплантации эндометриальных клеток.

Проведенные исследования свидетельствуют о том, что развитие эндометриоза происходит на фоне изменения продукции ряда важных белков, участвующих в регуляции действия гормонов, ангиогенеза, апоптоза, редокс-процессов, воспаления и иммунного ответа.

Выводы

1. Модификация протеомного спектра ПЖ является важным патогенетическим фактором развития НГЭ.

2. Белки, которые отсутствуют или появляются в ПЖ при эндометриозе, могут служить информативными маркерами данного заболевания.

Рецензенты:

Авруцкая В.В., д.м.н., ведущий научный сотрудник акушерско-гинекологического отдела, заведующая поликлиническим отделением ФГБУ «РНИИАП» Минздрава России. Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии» Минздрава России, г. Ростов-на-Дону;

Каушанская Л.В., д.м.н., главный научный сотрудник акушерско-гинекологического отдела ФГБУ «РНИИАП» Минздрава России. Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии» Минздрава России, г. Ростов-на-Дону.

Библиографическая ссылка

Томай Л.Р., Линде В.А., Ермолова Н.В., Гунько В.О., Погорелова Т.Н. РОЛЬ ПРОТЕМНОГО ДИСБАЛАНСА ПЕРИТОНЕАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ В ПАТОГЕНЕЗЕ НАРУЖНОГО ГЕНИТАЛЬНОГО ЭНДОМЕТРИОЗА // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=17171 (дата обращения: 01.02.2020). Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

Перитонеальная жидкость в норме обеспечивает равномерное смазывание поверхности органов брюшной полости и уменьшает трение между ними. Они прозрачна и абсолютно стерильна - в ней нет бактерий. Количество минимально - 5-20 мл. Состоит из воды, минимального количества и микроэлементов.

Образуется перитонеальная жидкость при фильтрации крови и возвращается обратно же в через лимфу. Баланс образования и обратного всасывания перитонеальной жидкости удерживает ее постоянное количество в брюшной полости.

Различные заболевания приводят к увеличению объема перитонеальной жидкости, в таком случае она называется асцитической .

Асцитическая жидкость - показатель патологии, неспособности удерживать равновесие между образованием и обратным всасыванием перитонеальной жидкости.

Перитонеальная жидкость в норме

количество - до 50 мл
цвет - от прозрачного до бледно желтого
и - нормальные показатели зависят от уровней в крови
- такой же уровень как и в крови
клетки - в незначительном количестве

Анализ асцитической жидкости - это

несколько видов исследований направленных на диагностику причин асцита - избыточного накопления жидкости в брюшной полости.

Процедура взятия асцитической жидкости для анализа называется парацентез .

Причины появления асцита

повышенное давление в сосудах печени - цирроз печени, хроническая сердечная недостаточность
воспаление брюшины в результате ее повреждения - инфекцией, опухолями (рак желудка, рак кишечника, первичный рак брюшины, лимфома), панкреатит, аутоиммунные болезни

Характер асцитической жидкости укажет на вид патологического процесса и поможет в выборе лучшего метода лечения.

Виды анализов перитонеальной и асцитической жидкости

внешняя оценка асцитической жидкости - количество, цвет, запах
биохимический анализ - ЛДГ, общий белок, расчет градиента альбумина, глюкоза,
микроскопия осадка - для выявления аномальных опухолевых клеток
окраска осадка по методу Грамма - позволяет в микроскопе увидеть бактерии
бакпосев на питательные среды с определением чувствительности к антибиотикам

Виды асцитической жидкости

транссудат
экссудат

Транссудат

Транссудат появляется при повышенном давлении в сосудах печени и просачивании жидкости в пространство брюшины, а также низким уровнем белка альбумина в крови, который в норме удерживает воду внутри сосудов.

Транссудат бывает при хронической сердечной недостаточности, нефротическом синдроме, циррозе печени.

Свойства транссудата

асцитическая жидкость прозрачна или слабо-соломенного цвета
общий белок - менее 3г/дл
альбумин - снижен, градиент более 1,1 г/дл
ЛДГ градиент кровь/асцитическая жидкость - менее 0,6
глюкоза - равна уровню в крови
микроскопия осадка - незначительное количество лимфоцитов
удельный вес - менее 1,015

Экссудат

Экссудативная асцитическая жидкость - результат повреждения брюшины бактериями, злокачественными новообразованиями, ферментами (например, поджелудочной железы), разрывом органов брюшной полости (желчного пузыря при желчекаменной болезни или кисты поджелудочной железы).

Свойства

цвет - от желтого до зеленоватого
общий белок в асцитической жидкости более 3 г/дл
альбумин повышен, градиент менее 1,1 г/дл
ЛДГ градиент более 0,6
глюкоза - ниже 3,3 ммоль/л
повышенное число лейкоцитов, главным образом в осадке
удельный вес - 1,015

Перитонеальная жидкость в норме и при заболеваниях

Внешние параметры

в норме перитонеальная жидкость прозрачна, слегка желтоватого оттенка
желтый цвет - при патологии печени с повышенным уровнем билирубина
молочный цвет - закупорка лимфатических сосудов
зеленоватый - присутствие желчи, что прямо указывает о разрыве желчевыводящих путей
при попадании крови асцитическая жидкость становится красной, что бывает при травме и опухолях
мутность - при размножении бактерий в брюшной полости

Биохимический анализ асцитической жидкости

в норме глюкоза в асцитической жидкости равна уровню в крови
амилазу исследуют только при подозрении на воспаление поджелудочной железы (парктератит)
опухолевые маркеры - для определения вида и возможной первичной локализации опухоли
ЛДГ - показатель распада клеток

Микроскопия осадка

Микроскопию осадка асцитической жидкости делают при подозрении на инфекцию или новообразование. В нормальных условиях осадок крайне скуден, в нем находят единичные лейкоциты (преимущественно лимфоциты), нет и бактерий.

нейтрофилы (подвид лейкоцитов) повышены при бактериальном поражении брюшины, а лимфоцитов - при туберкулезе брюшины
аномальные клетки (неправильной формы, большого размера и нетипичной окраски) встречаются при распространении опухоли по брюшине

Анализы на инфекции

окрашивание по Грамму - осадок наносят на предметное стекло и красят по Грамму, что позволяет обнаружить бактерии и грибки
бакпосев на питательные среды с выращиванием культуры в течение нескольких дней и определением ее чувствительности к антибиотикам
аденозин деаминаза - белок, значительно повышена при туберкулезе брюшины

Анализ перитонеальной и асцитической жидкости - норма и изменения при заболеваниях was last modified: Декабрь 6th, 2017 by Мария Бодян

Актуальность. Любая операционная травма на брюшине является стрессорным фактором, и одним из частых осложнений является процесс спайкообразования. Определенным влиянием на данный процесс оказывают цитологические изменения перитонеальной жидкости, изучение которых позволит предложить новые подходы к его управляемости не только при плановом проведении операций, но и в экстремальных условиях.

Цель исследования. Исследовать цитологические изменения перитонеальной жидкости в динамике операционного стресса.

Материал и методы. В исследовании были применены 60 крыс в возрасте 3 мес., достигшие массы 250-300 г, которым наносилась стандартная операционная травма. На экспериментальных животных проводилось исследование клеточного состава перитонеальной жидкости в процессе адгезиогенеза. Для этого в течение 5 дней до нанесения операционной травмы и через день на протяжении 30 дней в послеоперационном периоде производился забор перитонеальной жидкости с последующим ее цитологическим исследованием. При заборе перитонеальной жидкости животное предварительно фиксировалось в разработанном и запатентованном устройстве (Патент РФ №72405, зарегистрирован 20.04.2008.). Забор перитонеальной жидкости включал в себя следующие этапы: лапаролифтинг передней брюшной стенки с использованием элементов предложенного устройства, забор перитонеальной жидкости с помощью разработанного устройства для пункции брюшной полости (Патент РФ №89954, зарегистрирован 02.12.09). Материал для цитологического исследования центрифугировался, надосадочную жидкость удаляли, из полученной взвеси делали мазки. Мазки окрашивались методом Романовского-Гимзе, подвергали цитологическому анализу с использованием световой микроскопии.

На 90 крысах исследовался уровень спаечного процесса. В трех (по 30 животных) ранее описанных группах осуществлялся расчет уровня спаечного процесса в динамике операционной травмы на 10-е, 20-е и на 30-е сутки (последний срок характеризовал время окончательного формирования перитонеальных сращений). Для этой цели после релапаротомии производилась ревизия брюшной полости, определялся морфологический тип каждой обнаруженной спайки.

Расчет уровня спаечного процесса осуществлялся в абсолютных числах с использованием ранее разработанной и запатентованной математической формулы. Полученные результаты обрабатывали с использованием стандартных статистических методов.

Полученные результаты. При цитологическом исследовании перитонеальной жидкости в приготовленных мазках всех экспериментальных групп обнаруживались следующие клеточные элементы: эритроциты, лимфоциты, лейкоциты, эозинофилы, сегментоядерные лейкоциты, моноциты, мезотелий, реже встречались макрофаги и фибробластоподобные клетки. Цитологическая картина перитонеальной жидкости имела четкую взаимосвязь с объемом операционной травмой и функциональными нарушениями брюшины.

Клеточный состав перитонеальной жидкости в группе со стандартной операционной травмой характеризовался следующими изменениями: число эритроцитов восстанавливалось к 10-м суткам после выполнения операционной травмы. Лейкоциты снижались в течение 3-5 суток после операции с установлением средне нормального уровня содержания лейкоцитов к 9 суткам; клетки моноцитарно-макрофагального ряда увеличивались только на 8-10 сутки; относительно небольшое повышение количества лимфоцитов отмечалось в первые 5-7 суток после операции.

На 10-е сутки после нанесения стандартной операционной травмы рассчитанный УСП составил 0,31 ± 0,01 см3, с увеличением срока УСП имел тенденцию к увеличению, достигнув к 20 сут - 0,34 ± 0,02 см3 и к 30 сут. - 0,36 ± 0,01 см3.

Выводы. Клеточный состав перитонеальной жидкости находится в прямой зависимости от объема операционной травмы, при этом стабильность качества клеточного состава перитонеальной жидкости сопровождается изменением ее количества в динамике регенераторного ответа брюшины. Восстановление исходного характера цитологической составляющей перитонеальной жидкости к 15-23 суткам, не обеспечивает стабилизацию адгезиогенеза, продолжающегося до 30 суток.

Библиографическая ссылка

Мендалиева А.С. ЦИТОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПЕРИТОНЕАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ В ДИНАМИКЕ ОПЕРАЦИОННОГО СТРЕССА // Успехи современного естествознания. – 2011. – № 8. – С. 121-122;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=27712 (дата обращения: 01.02.2020). Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

Перитонеальная жидкость – это смазочная жидкость (вырабатываемая и поглощаемая брюшиной), находящаяся в брюшной полости. Брюшная полость это пространство между абдоминальными органами (например, желудком, селезенкой, печенью и желчным пузырем) и мембраной, выстилающей стенки живота.

Перитониальная жидкость – прозрачная, стерильная жидкость, состоящая в основном из воды и небольшого количества лейкоцитов, антител, электролитов и других биохимических веществ. Основной функцией перитониальной жидкости является уменьшение трения, вызываемого движением органов брюшной полости.

Причины проведения анализа

У здоровых людей в брюшной полости содержится небольшое количество перитониальной жидкости. Но определенные проблемы могут привести к ее избыточному накоплению. Эта жидкость, которую также называют асцитической, может привести к состоянию, называемому асцит. Это одно из осложнений, вызываемых циррозом.

Некоторые инфекции и микроорганизмы также могут вызывать перитонит – воспаление перитониальной мембраны.

В таком случае проводится посев перитониальной жидкости. Он нужен для того, чтобы диагностировать проблему и начать лечение.

Посев перитонеальной жидкости

Это лабораторный тест, во время которого из брюшной полости берется проба жидкости, исследуемой затем на микроорганизмы, бактерии и грибки, способные вызвать инфицирование.

Процедура

Из брюшной полости извлекут немного перитониальной жидкости, которую затем направят в лабораторию, где проведут посев и окраску по граму. Процедура взятия образца называется .

Подготовка

Перед началом лапароцентеза необходимо опорожнить мочевой пузырь.

Место прокола очистят антисептиком.

Обезболят (с помощью местной анестезии).

Вставят иглу (или тракар с конюлей, для чего могут сделать небольшой разрез) и извлекут образец жидкости.

При извлечении большого объема жидкости, пациент можете почувствовать слабое головокружение.

Риски, связанные с процедурой

Существует небольшой риск того, что игла проколет мочевой пузырь, кишечник или кровеносный сосуд. Это может привести к перфорации и кровотечению, или инфицированию кишечника.

Рак яичников и шейки матки являются главными видами рака, приводящего к смерти женщин. Коварство этих болезней в том, что часто они никак себя не проявляют или имеют слабо выраженные симптомы. Из-за этого, опухоль может вырасти до серьезных размеров, прежде чем ее обнаружат. Цитологическое исследование перитонеальной жидкости может быть очень полезным при обнаружении раковых клеток или других генетических аномалий яичников и шейки матки на ранней стадии.